1分鐘解鎖陽離子脂質(zhì)體和陽離子聚合物PEI轉(zhuǎn)染試劑的差異
導(dǎo)讀
陽離子脂質(zhì)體
圖1. 脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)（源于Nature）
a.最簡單的脂質(zhì)體，由磷脂雙分子層構(gòu)成的脂質(zhì)囊泡
b.“隱身”脂質(zhì)體，通過PEG修飾實現(xiàn)長循環(huán)
c.大多數(shù)陽離子脂質(zhì)體具有洋蔥樣結(jié)構(gòu)，DNA夾在陽離子膜之間
d.Kubitschke等人報道的新型脂質(zhì)體，由花瓶狀的脂質(zhì)分子(分子兩側(cè)有疏水鏈和親水鏈)組成雙分子層
同時，人們也一直在尋找更有效、毒性小，同時對研究影響也小的轉(zhuǎn)染試劑。由于脂質(zhì)類轉(zhuǎn)染試劑對細(xì)胞的毒性是由其脂質(zhì)特性決定的，眾多的研究者和生物公司將新一代轉(zhuǎn)染試劑的開發(fā)聚焦在非脂質(zhì)體的聚合物上。
圖2. 陽離子脂質(zhì)體與陽離子聚合物介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染
◆ 不含疏水部分而完全溶于水
◆ 方便地進(jìn)行化學(xué)修飾
◆ 不像脂質(zhì)體一樣破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)
◆ 濃縮DNA，將DNA運送到細(xì)胞內(nèi)，并其在細(xì)胞核內(nèi)釋放
◆ 細(xì)胞毒性很低，很穩(wěn)定
◆ 不被血清清除
◆ 毒性低、成本低、免疫原性低
◆ 可將外源基因轉(zhuǎn)染到懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞中
圖3. PEI轉(zhuǎn)染DNA示意圖（源于網(wǎng)絡(luò)）
PEI是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子，每相隔二個碳原子，即每第三個原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”(proton sponge)體。自1995年P(guān)EI首次被用于DNA轉(zhuǎn)染以來，就因其安全性和穩(wěn)定性而被廣泛應(yīng)用于科學(xué)研究和基因療法中。
圖4. PEI使用效果圖
a. PEI 40000轉(zhuǎn)染GFP質(zhì)粒到貼壁細(xì)胞Hek-293，72h后，轉(zhuǎn)染效率達(dá)到90%（左圖）
b.PEI 40000轉(zhuǎn)染GFP質(zhì)粒到懸浮細(xì)胞CHO-K1，72h后，轉(zhuǎn)染效率達(dá)到80%（右圖）
目前翌圣提供了多種轉(zhuǎn)染試劑，客戶可根據(jù)轉(zhuǎn)染核酸的種類/貼壁細(xì)胞/懸浮細(xì)胞等條件，選擇合適的轉(zhuǎn)染試劑，我們將在下期進(jìn)行說明。
[1]. Andrzej W.Cwetsch, Bruno Pinto, Annalisa Savardi, Laura Cancedda. In vivo methods for acute modulation of gene expression in the central nervous system. Progress in Neurobiology. 2018 September 2018, Pages 69-85. doi.org/10.1016/j.pneurobio.2018.04.008
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應(yīng)用場景 |
名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
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細(xì)胞類型：貼壁/懸浮 核酸類型：DNA、siRNA |
40802ES02 |
0.5 mL |
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40802ES03 |
1.0 mL |
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40802ES08 |
5×1 mL |
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細(xì)胞類型：貼壁/懸浮 |
40803ES70 |
200 T |
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用途：病毒感染、DNA轉(zhuǎn)染 |
40804ES76 |
500 μL |
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40804ES86 |
5×500 μL |
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細(xì)胞類型：懸浮 |
40805ES02 |
0.5 mL |
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40805ES03 |
1.0 mL |
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40805ES08 |
5×1 mL |
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細(xì)胞類型：貼壁/懸浮 |
40806ES01 |
0.1 mL |
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40806ES02 |
0.5 mL |
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40806ES03 |
1.0 mL |
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細(xì)胞類型：貼壁/懸浮 |
40808ES02 |
0.5 mL |
|
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40808ES03 |
1 mL |
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40808ES08 |
5×1 mL |
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細(xì)胞類型：貼壁/懸浮 |
40809ES01 |
0.1 mL |
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40809ES03 |
1 mL |
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細(xì)胞類型：貼壁/懸浮 |
40815ES03 |
1 g |
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40815ES08 |
5×1 g |
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細(xì)胞類型：貼壁/懸浮 |
40816ES02 |
100 mg |
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40816ES03 |
1 g |
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細(xì)胞類型：293 |
40820ES04 |
1.5 mL |
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40820ES10 |
10 mL |
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40820ES60 |
100 mL |
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細(xì)胞類型：293 核酸類型：DNA 用途：AAV/LV載體大規(guī)模生產(chǎn) |
40821ES10 |
10 mL |
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40821ES60 |
100 mL |
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40821ES80 |
1 L |
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