認識PEI
聚乙烯亞胺（Polyethylenimine，PEI）有被稱作為聚亞乙基亞胺、聚氮雜環(huán)丙烷，是一種水溶性較高的分子聚合物。PEI分子結構中含有伯胺、仲胺、叔胺等基因，具有較高的化學反應性，是目前已知的電荷密度最大的陽離子有機高分子材料。
PEI由于具有高附著性、高吸附性、高陽離子性、高反應性等優(yōu)點，當前主要被應用在涂料、油墨、膠粘劑、纖維處理、污水處理等領域，在醫(yī)藥方面也得到越來越廣泛的應用。用于基因的遞送可以追溯到1995年，由Otman Boussif首次報告可用作非病毒載體使用，隨后越來越多的研究者參與到PEI作為轉染試劑的研究。與脂質體及其他非病毒載體相比，PEI陽離子密度高、性質穩(wěn)定、結構靈活、生物相容性更好、細胞毒性更小。
PEI轉染的原理
PEI聚乙烯亞胺是目前研究最廣泛的陽離子聚合物非病毒基因載體，它是由單體(-CH,CH,-NH-)構成的具有伯胺﹑仲胺和叔胺基團的水溶性聚合物。PEI單體中每3個原子含1個氮，并構成同的胺基。每相隔二個碳原子，即每第三個原子都是質子化的氨基氮原子，使得聚合物網(wǎng)絡在任何pH下都能充當有效的質子海綿(proton sponge)體。這是PEI有較強的結合DNA和黏附細胞并作為基因轉導載體的重要原因。
圖 pH值與質子化關系
（源自：doi.org/10.1021/acs.macromol.0c01501）
PEI 能將 DNA 縮合成帶正電荷的微粒，這些微?？梢责ず系綆в胸撾姾傻募毎砻鏆埢?，并通過胞吞作用進入細胞。一旦進入細胞，胺的質子化導致反離子大量涌入以及滲透勢降低，在低pH環(huán)境中實現(xiàn)DNA胞內(nèi)釋放。最被接受的觀點是PEI上未質子化的胺可以在與膜結合的細胞器（如溶酶體）中吸收氫離子，這將導致更多氫離子的流入，同時帶來更多的氯離子和水，誘發(fā)滲透溶脹。而質子化胺之間的排斥引起PEI構象的改變，上述變化導致的滲透膨脹使囊泡釋放聚合物與 DNA 形成的復合物進入細胞質。復合物拆解后，DNA 能自由的融合到細胞核中。
翌圣PEI使用的特點
1. 純化學合成，不含動物源成分；
2. 擁有細胞毒性低、轉染效率高；
3. 兼容抗生素與血清；
4. 在HEK293等細胞中基因表達效率較高，特別適合多質粒的共同轉染，用于重組病毒載體的生產(chǎn)，以及重組蛋白的瞬時表達生產(chǎn)。
翌圣PEI使用的實例
1. 懸浮細胞293F的重組蛋白表達
培養(yǎng)條件：100μg/ml青霉素-鏈霉素+SMM 293-T II無血清培養(yǎng)基+37°C、5% CO2條件下培養(yǎng)
細胞密度：2.0-3.0×106 cell/ml
5天后，收集培養(yǎng)基，通過Ni親和層析和大小排阻層析純化重組蛋白。
2. 慢病毒包裝
細胞：293T
收獲時間：48h
PEI使用常見問題
Q1：多配置一點母液凍存起來是否會延長效期？
A：不建議凍存，儲存液4℃保存3個月
Q2：轉染后是否需要換液？
A：若轉染前進行了換液，可不進行換液，若需要換液可在轉染后6-8h可以進行換液。
Q3：轉染的時候是否需要無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)？
A：制備復合物的時候需要使用無血清培養(yǎng)基，加入細胞中的時候不要求無血清培養(yǎng)。
產(chǎn)品訂購
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應用場景 |
名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
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細胞類型：貼壁/懸浮 |
40815ES03 |
1 g |
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40815ES08 |
5×1 g |
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細胞類型：貼壁/懸浮 |
40816ES02 |
100 mg |
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40816ES03 |
1 g |
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細胞類型：293 |
40820ES04 |
1.5 mL |
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40820ES10 |
10 mL |
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40820ES60 |
100 mL |
相關產(chǎn)品
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應用場景 |
名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
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細胞類型：貼壁/懸浮 核酸類型：DNA、siRNA |
40802ES02 |
0.5 mL |
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40802ES03 |
1.0 mL |
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40802ES08 |
5×1mL |
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細胞類型：貼壁/懸浮 |
40803ES70 |
200 T |
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用途：病毒感染、DNA轉染 |
40804ES76 |
500 μL |
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40804ES86 |
5×500 μL |
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細胞類型：懸浮 |
40805ES02 |
0.5 mL |
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40805ES03 |
1.0 mL |
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40805ES08 |
5×1 mL |
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細胞類型：貼壁/懸浮 |
40806ES01 |
0.1 mL |
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40806ES02 |
0.5 mL |
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40806ES03 |
1.0 mL |
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細胞類型：貼壁/懸浮 |
40808ES02 |
0.5 mL |
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40808ES03 |
1 mL |
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40808ES08 |
5×1 mL |
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細胞類型：貼壁/懸浮 |
40809ES01 |
0.1 mL |
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40809ES03 |
1 mL |
客戶使用該產(chǎn)品發(fā)表的科研文獻（不完全統(tǒng)計：部分）
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