產(chǎn)品描述

Hoechst 33258 是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，它在嵌入雙鏈 DNA 后釋放強(qiáng)烈的藍(lán)色熒光，對細(xì)胞的毒性較低。Hoechst 33258 常用于細(xì)胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測。也可以用于普通的細(xì)胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。可用于固定細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色，也可用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。

本系列產(chǎn)品均以溶液形式提供，其中Hoechst 33258 染液 (1 mg/mL)（Cat No.40730ES03）為特定濃度的產(chǎn)品，其濃度為1 mg/mL。用于細(xì)胞核染色時，推薦工作濃度為0.5-10 μg/mL。如需使用粉末狀該產(chǎn)品，可選購Hoechst 33258（Cat No. 40729ES25）。
 

產(chǎn)品性質(zhì)

中文名稱（Chinese Synonym）	二苯甲亞胺, 三氯化氫 2'-(4-羥基苯基)-5-(4-甲基-1-哌嗪基)-2,5'-二-1H-苯并咪唑
英文名稱（English Synonym）	2’-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole, Trihydrochloride；bisBenzimide H 33258; HOE 33258
分子式（Molecular Formula）	C25H24N6O·3HCl
分子量（Molecular Weight）	533.88
CAS號（CAS NO.）	23491-45-4
熒光光譜（Fluorescence Spectral）	Hoechest 33258的Ex/Em=346/460; Hoechest 33258-核酸的 Ex/Em=350/460; 熒光可用氙氣燈，泵弧燈或者UV激光激發(fā)；可用DAPI濾光器、藍(lán)色GFP濾光器、Alexa Fluor 350濾光器等檢測。
純度（Purity）	≥95%（HPLC）
結(jié)構(gòu)（Structure）

運輸與保存方法

冰袋（wet ice）運輸。4℃避光保存。

1 mg/mL 的Hoechst 33258儲存液，有效期1年。
 

使用方法

對于1 mg/mL的Hoechst33258在使用時需用PBS或合適的緩沖液配制成0.5-10 μg/mL的染色液。

1. 對于固定的細(xì)胞或組織：

a）對于細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行免疫熒光染色，則先進(jìn)行免疫熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33258染色。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33258 染色。

b）對于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量 Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可。對于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品體積 3 倍的染色液，并混勻。室溫放置 3～5分鐘。

c）吸除 Hoechst 33258 染色液，用 TBST、PBS 或生理鹽水洗滌 2～3 次，每次3～5 分鐘。

d）直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。觀察細(xì)胞凋亡時，會看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。激發(fā)波長350 nm，發(fā)射波長460 nm。

2. 對于活細(xì)胞或組織：

a）細(xì)胞培養(yǎng)物中加入適量Hoechst 33258染色液，約1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積，必須充分覆蓋住待染色的樣品。通常對于六孔板一個孔需加入1 mL染色液，對于96孔板一個孔需加入100 μL染色液。 

b）在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的溫度培養(yǎng) 20～30 分鐘。

c）棄染色液，用PBS或合適的緩沖液洗細(xì)胞兩次。

d）直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。激發(fā)波長350 nm，發(fā)射波長460 nm。

 

注意事項

1）Hoechst 33258 對人體有一定刺激性，請注意適當(dāng)防護(hù)。

2）熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡量當(dāng)天完成檢測。

3）為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。

4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

5）本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品貨號	產(chǎn)品編號	規(guī)格
Trypan blue 臺盼藍(lán)	40724ES10	10 g
Hoechst 33258	40729ES10	10 mg
Hoechst 33258 染液（1 mg/mL） Hoechst 33258 Stain Solution (1 mg/mL)	40730ES03	1 mL
Hoechst 33342	40731ES10	10 mg
Hoechst 33342 染液（1mg/mL）Hoechst 33342 Stain Solution (1 mg/mL)	40732ES03	1 mL
Propidium iodide Staining Solution（1mg/mL）碘化丙啶染液（1 mg/mL）	40710ES03	1 mL
PI (Propidium iodide) 碘化丙啶	40711ES10	10 mg
7-AAD 7-氨基放線菌素D	40722ES03	1 mg
7-AAD Viability Staining Solution 7-AAD細(xì)胞活力染色液	40745ES64	150 T
Fluoromount-GTM 抗熒光淬滅封片劑（水溶性）	36307ES08	5 mL
DAPI Fluoromount-GTM 抗熒光淬滅封片劑（含DAPI，水溶性）	36308ES11	4 mL
DAPI染液（5 mg/mL）	40728ES03	1 mg (200 μL)

HB200211