產(chǎn)品描述
 

7-Aminoactinomycin D，簡稱7-AAD，是一種核酸染料，與DNA結(jié)合后可發(fā)出強烈的熒光，其熒光特性與PI相似，可被488nm氬離子激光激發(fā)，但其發(fā)射光譜較PI窄，且發(fā)射波長更長，對其他檢測通道的干擾更小，在多色熒光分析中是PI的最佳替代品，可與多種488激發(fā)光激發(fā)的熒光染料聯(lián)合使用，如FITC，PE等。

另外，7-AAD是一種非滲透性熒光染料。該染料不能透過活細胞的細胞膜，但可穿透膜損傷細胞如晚期凋亡細胞或者壞死細胞的細胞膜并與其內(nèi)的DNA結(jié)合，可用來區(qū)分存活的早期細胞和壞死或晚期凋亡細胞，廣泛用于流式細胞儀。

產(chǎn)品性質(zhì)
 

運輸和保存方法
 

室溫運輸，-20℃干燥避光保存，有效期一年。
 

注意事項

 

1）7-AAD為潛在致癌物質(zhì)，操作時請穿戴手套、眼罩以及其他防護措施，以避免接觸皮膚。
2）玻璃器皿上殘留的去垢劑也會影響染色的效果，導致細胞存在或不存在都會出現(xiàn)強熒光。玻璃器皿的清洗應用去垢劑，然后用自來水沖洗數(shù)遍后，用去離子水或蒸餾水漂洗。

3）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
4) 本產(chǎn)品僅作科研用途！

使用方法
 

注：該操作說明適用于大多數(shù)細胞，但不同的細胞類型、細胞密度、使用的培養(yǎng)基以及其他一些因素都有可能影響染色效果，本說明僅供參考。

1）儲存液的制備：取適量DMSO加入到7-AAD配制成1-10 mM，該儲存液可分裝于-20℃穩(wěn)定保存6個月。

2）根據(jù)自身樣本選擇合適的步驟固定細胞。7-AAD染色一般在其它染色完成后再進行，且僅僅染色死細胞。

3）離心收集細胞，并用合適的的緩沖鹽溶液或者培養(yǎng)基(pH=7.4)重懸細胞。

注：貼壁細胞可在蓋玻片或者培養(yǎng)板上進行原位染色。

4）加入適量7-AAD染色液，推薦該染料的工作濃度為0.5-5 µM，孵育15-60 min。

注：首次實驗建議在推薦的工作濃度范圍內(nèi)設置濃度梯度檢測，從而摸索最佳的染色濃度。

5）根據(jù)其激發(fā)發(fā)射波長（Ex/Em=545 nm/650 nm）在流式細胞儀下(FL3通道)檢測熒光強度。

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