早篩是降低腫瘤死亡率的有效途徑

全球每年有近兩千萬癌癥新增病例和近千萬癌癥死亡病例，而我國的癌癥患病率處于國際中等偏上水平。WHO認(rèn)為三分之一的癌癥可通過早期發(fā)現(xiàn)得到根治。相比于晚期癌癥，早期癌癥未發(fā)生轉(zhuǎn)移，更容易通過手術(shù)、放化療等手段清除，在癌癥早期進行治療干預(yù)，有助于增加患者存活機會，減輕痛苦，降低經(jīng)濟負擔(dān)。目前尚無有效治療晚期癌癥的手段，及早發(fā)現(xiàn)及早治療被認(rèn)為是處置癌癥最有效的手段，因此提升腫瘤檢測的靈敏度對于提高癌癥患者生存率具有重大意義，這其中早篩早診將會起到重要作用。

圖1 惡性腫瘤漫長生長（數(shù)據(jù)來源：蛋殼研究院）

檢測技術(shù)各放異彩
 

根據(jù) CB Insights 數(shù)據(jù)，在液體活檢的所有細分應(yīng)用領(lǐng)域中，腫瘤早篩是增速最快的，預(yù)計 2023 年市場規(guī)模達到 3.44 億美元，復(fù)合增速 71.8%。從腫瘤發(fā)生與轉(zhuǎn)移機制看，腫瘤細胞通過被動分泌（壞死或凋亡）與主動分泌釋放外泌體及 ctDNA、cfRNA 等進入血液，可在超早期探測到腫瘤信號。以 ctDNA 為代表的液體活檢技術(shù)在腫瘤早篩領(lǐng)域有較大發(fā)展?jié)摿?。為了追蹤腫瘤，需要區(qū)別 ctDNA 與正常 cfDNA 的區(qū)別，目前主要通過基因突變、甲基化修飾狀態(tài)、拷貝數(shù)異常，以及核小體站位等作為區(qū)分依據(jù)。
 

表1 部分早篩產(chǎn)品技術(shù)對比

公司	產(chǎn)品	檢測內(nèi)容	病種
諾輝健康	常衛(wèi)清	KRAS基因突變，BMP3/NDRG4甲基化，血紅蛋白	結(jié)直腸癌
和瑞基因	萊思寧	拷貝數(shù)變異，末端序列特征，核小體分布，DNA片段化，5hmc等	肝癌
泛生子	HCCscreen	cfDNA甲基化及突變、AFP、DCP	肝癌、肺癌、消化道癌癥
燃石醫(yī)學(xué)	BrELSATM	超深甲基化靶向測序	泛癌種
華大基因	華甘寧	25個肝癌相關(guān)基因甲基化水平	肝癌
鹍遠基因	常樂思	綜合檢測Septin9基因等多個基因甲基化區(qū)域	結(jié)直腸癌
GRAIL	Galleri	多組甲基化DNA標(biāo)記	超過50種癌癥的泛癌種篩查
Exact Sciences	Cologuard	KRAS基因突變，BMP3/NDRG4甲基化，β肌動蛋白基因，血紅蛋白	結(jié)直腸癌
Guardanthealth	Lunar-2	基因組突變，異常甲基化修飾，片段組檢測	結(jié)直腸癌

總體來看，早篩產(chǎn)品在NGS方面主流的技術(shù)路線主要有兩種，一種是基因甲基化特征的cfDNA甲基化測序，另一種是基于cfDNA片段化末端特征及CNV的全基因組測序?；诩谆腘GS技術(shù)通?？煞譃椴东@法或多重PCR來獲得目標(biāo)區(qū)域通過機器學(xué)習(xí)，模型分析獲得早期腫瘤微弱信號，基于cfDNA片段化末端特征及CNV的檢測通?；诓煌愋偷幕蚪M建庫，對標(biāo)志物進行AI算法分析，來捕捉到腫瘤早期微弱信號的差異。

不同的早篩實現(xiàn)技術(shù)各放異彩，推動著早篩領(lǐng)域迅速發(fā)展，對于早篩產(chǎn)品，敏感性、特異性、診斷效率、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值是非常重要的產(chǎn)品指標(biāo)，因此，產(chǎn)品原料對這些性能有非常重要的影響，翌圣生物作為生命科學(xué)原料企業(yè)，通過長期匠心修煉，開發(fā)出一系列生命科學(xué)工具，和您攜手助力早篩領(lǐng)域的發(fā)展。
 

翌圣NGS產(chǎn)品解決方案

目前隨著生命科學(xué)及診斷產(chǎn)業(yè)持續(xù)高速增長，市場對高質(zhì)量上游產(chǎn)品的需求日益增大，特別是疫情期間更是出現(xiàn)診斷關(guān)鍵設(shè)備和原料被卡脖子的被動境況。伴隨中國生命科學(xué)產(chǎn)業(yè)的崛起、世界范圍內(nèi)診斷行業(yè)快速增長，中國工具產(chǎn)業(yè)迅速崛起?？煽康膰a(chǎn)上游平臺原料工具對于下游產(chǎn)品性能有非常重要的作用。翌圣生物是一家專注于生命科學(xué)工具類產(chǎn)品開發(fā)的高新技術(shù)企業(yè)，在早篩領(lǐng)域，翌圣也在致力于開發(fā)相應(yīng)的早篩產(chǎn)品上游原料，基于甲基化特征方面的甲基化建庫或者基于cfDNA片段化及末端特征的全基因組建庫，小翌分別推薦翌圣甲基化建庫試劑盒及全基因組建庫試劑盒。

 

甲基化建庫產(chǎn)品推薦

Hieff NGS® Methyl-seq ssDNA library Prep Kit是一款用于Illumina®測序平臺的單鏈DNA甲基化建庫試劑盒，適用于各種經(jīng)Bisulfite處理的樣本，包括gDNA、FFPE DNA、cell free DNA（cfDNA）、ChIP DNA等，可以滿足1 ng~200 ng 起始量的樣本建庫。相較于傳統(tǒng)的雙鏈DNA甲基化建庫，我們提供了一種基于DNA單鏈的甲基化建庫方法，經(jīng)過DNA變性、3’ Adapter連接、互補鏈延伸、5’Adapter連接及文庫擴增，將Bisulfite處理的DNA片段最終轉(zhuǎn)化為適用于Illumina®平臺測序的文庫。本產(chǎn)品不僅更加經(jīng)濟，同時也提供了簡便快速的建庫流程，一般在3小時左右可以完成正常建庫。

 

數(shù)據(jù)展示

一、產(chǎn)量高、兼容不同類型樣本、數(shù)據(jù)展現(xiàn)好

分別以gDNA、FFPE、cfDNA為模板，進行建庫（轉(zhuǎn)化試劑盒：EZ DNA Methylation-Gold Kit（Zymo Cat No. D5005）），和國外競品對比，本試劑盒文庫產(chǎn)率要比競品高（圖1）。在測序數(shù)據(jù)方面翌圣Mapping ratio(%)比競品略高（圖2），dup ratio(%)和競品相當(dāng)。

圖1 gDNA、FFPE、cfDNA樣本文庫產(chǎn)率

 

圖2 不同類型樣本Mapping ratio(%)

 

圖3不同類型樣本dup ratio(%)

二、捕獲后數(shù)據(jù)表現(xiàn)好

分別以gDNA、cfDNA為模板，進行建庫及靶向捕獲（轉(zhuǎn)化試劑盒：EZ DNA Methylation-Gold Kit（Zymo Cat No. D5005）捕獲試劑：xGen Hybridization and Wash Kit（IDT Cat No. 1080577）捕獲Panel：客戶定制化Panel），和國外品牌競品對比，本試劑盒文庫uniq ratio、On-target reads rate均明顯優(yōu)于競品（圖4）。

圖4 gDNA、cfDNA建庫+靶向捕獲uniq ratio、On-target reads rate

 

全基因組建庫產(chǎn)品推薦

Hieff NGS® Ultima Pro DNA Library Prep Kit for Illumina® V2是針對Illumina®高通量測序平臺專業(yè)開發(fā)設(shè)計的新一代建庫試劑盒。本產(chǎn)品采用高質(zhì)量的酶學(xué)組成，在前一代建庫試劑盒的基礎(chǔ)上，改進了DNA片段末端修復(fù)和加A效率，同時改善了接頭連接效率。本試劑盒采用新型的高保真酶，顯著提高擴增均一性和保真性，可應(yīng)用于常規(guī)動植物基因組、微生物基因組、FFPE、cfDNA、ChIP DNA等樣本，助力獲得好的測序數(shù)據(jù)。

數(shù)據(jù)展示

一、文庫產(chǎn)出高

分別以NA12878、小牛gDNA為模板，100ng投入量進行建庫，Yeasen產(chǎn)品與競品對比文庫產(chǎn)率明顯高于競品（圖1）。以5ng cfDNA為模板，進行文庫構(gòu)建，翌圣建庫產(chǎn)量要明顯高于競品（圖2）。

圖1 FFPE、cfDNA樣本文庫產(chǎn)量

 

圖2 cfDNA樣本文庫產(chǎn)量

二、保真性好

以5ng cfDNA為模板，進行文庫構(gòu)建，Yeasen產(chǎn)品mismatch和indel率低于競品（圖3）

圖3 cfDNA樣本mismatch和indel率

三、較低的接頭自連率

以5ng cfDNA為模板，進行文庫構(gòu)建，Yeasen產(chǎn)品Total diff chr率低于競品（圖4）

圖4 cfDNA樣本Total diff chr率
 

除了上述兩款產(chǎn)品外，翌圣還有更多性價比高的NGS相關(guān)產(chǎn)品，比如Hieff NGS® DNA Selection Beads 分選磁珠(12601ES)，可完美替代AMPure XP Beads，還有dsDNA HS Assay Kit for Qubit®等產(chǎn)品供客戶選擇。當(dāng)然客戶亦可根據(jù)自身需求，選擇建庫模塊來滿足自己的產(chǎn)品應(yīng)用。歡迎大家登錄翌圣官網(wǎng)進行咨詢（http://www.jingtongjz.com/）。

 

產(chǎn)品詳情

類別	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品編號	規(guī)格
甲基化建庫試劑盒 Illumina	Hieff NGS® Methyl-seq DNA library Prep kit for Illumina®	12211ES08	8T
		12211ES24	24T
		12211ES96	96T
全基因組建庫試劑盒 Illumina	Hieff NGS® Ultima Pro DNA Library Prep Kit for Illumina® V2	12197ES08	8T
		12197ES24	24T
		12197ES96	96T
全基因組建庫試劑盒 MGI	Hieff NGS® Ultima Pro DNA Library Prep Kit for Illumina® V2	13311ES16	16T
		13311ES96	96T
純化磁珠	Hieff NGS® DNA Selection Beads 分選磁珠(完美替代AMPure XP Beads)	12601ES03	1mL
		12601ES08	5mL
		12601ES56	60mL
		12601ES75	450mL
定量試劑	dsDNA HS Assay Kit for Qubit®	12640ES60	100T
		12640ES76	500T
Illumina接頭	Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1	12615ES04	12×4 T
		12615ES16	12×16 T
	Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 2	12616ES04	12×4 T
		12616ES16	12×16 T
	Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 3	12617ES04	12×4 T
		12617ES16	12×16 T
	Hieff NGS® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 4	12618ES04	12×4 T
		12618ES16	12×16 T
MGI接頭	Hieff NGS® Complete Adapter Kit for MGI®, Set 1	13360ES02	8×2 T
		13360ES04	8×4 T
		13360ES96	8×100 T
	Hieff NGS® Complete Adapter Kit for MGI®, Set 2	13361ES02	16×2 T
		13361ES04	16×4 T
		13361ES96	16×100 T
	Hieff NGS® Complete Adapter Kit for MGI®, Set 3	13362ES02	96×2 T
		13362ES04	96×4 T
		13362ES96	96×100 T
UMI接頭	Hieff NGS® Dual UMI UDB Adapter Kit for MGI®, Set1	13367ES02	48×2 T
		13367ES04	48×4 T
	Hieff NGS® Dual UMI UDB Adapter Kit for MGI®, Set2	13368ES02	48×2 T
		13368ES04	48×4 T