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            Hieff NGS? DNA Selection Beads 分選磁珠(完美替代AMPure XPBeads)
             
            更多活動更多優(yōu)惠，盡在翌圣商城》
             
             
             
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            產(chǎn)品說明書
                  
            FAQ
                  
            COA
                  
            已發(fā)表文獻
                  
             
            產(chǎn)品信息
            


            
	
		
            
			
			
            產(chǎn)品名稱
            
			            		
			
			
            產(chǎn)品編號
            
			            		
			
			
            規(guī)格
            
			            		
		
            
		
            
			
			
            Hieff NGS® DNA Selection Beads DNA分選磁珠
            
			            		
			
			
            12601ES03
            
			            		
			
			
            1 mL
            
			            		
		
            
		
            
			
			
            12601ES08
            
			            		
			
			
            5 mL
            
			            		
		
            
		
            
			
			
            12601ES56
            
			            		
			
			
            60 mL
            
			            		
		
            
		
            
			
			
            12601ES75
            
			            		
			
			
            450 mL
            
			            		
		
            
	            

            


            產(chǎn)品描述
            


            Hieff NGS® DNA Selection Beads基于SPRI (Solid Phase Reverse Immobilization)原理，配合精心優(yōu)化過的緩沖體系，可用于二代測序文庫構(gòu)建過程中的DNA片段分選、純化。本產(chǎn)品可適用于各品牌的DNA、RNA建庫試劑盒，和目前廣泛使用的AMPure XP Beads使用方式相同，片段回收效率和文庫大小分布均與AMPure XP Beads高度吻合。
            


             
            


            運輸與保存方法
            


            冰袋運輸。2 ~ 8℃保存，效期18個月。避免冷凍！
            


             
            


            注意事項
            


            1）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
            


            2）磁珠使用前須在室溫平衡至少30 min。
            


            3）80%乙醇需現(xiàn)用現(xiàn)配，否則將影響回收效率。
            


            4）進行長度分選時，初始樣品體積需≥100μL，不足時請用超純水補齊。樣品體積太小，將導(dǎo)致移液誤差增大，進而影響分選的準確性。
            


            5) 本產(chǎn)品僅用作科研用途！
            


             
            


            使用方法 
            


            1. 準備工作
            


            將磁珠由冰箱中取出，室溫平衡至少30 min。配制80%乙醇。
            


            2. 長度分選（雙輪法）
            


            長度分選操作流程如圖1所示，具體操作如下。
            


            


             
            


            圖1雙輪分選操作流程
            


            1）請渦旋振蕩或充分顛倒磁珠以保證混勻。
            


            2）根據(jù)要求，參考表1向DNA溶液中加入第一輪分選磁珠，渦旋混勻或移液器吹打10次混勻。
            


            3）室溫孵育5 min。
            


            4）將離心管短暫離心并置于磁力架中，待溶液澄清后（約5 min），小心轉(zhuǎn)移上清到干凈的離心管中。
            


            注意：轉(zhuǎn)移上清時，請殘留2 μL液體于管底，切勿全部吸出上清，避免吸到磁珠并影響分選效果。
            


            舉例：當(dāng)初始體積為100 μL，第一輪使用0.8×比例，即加入80 μL磁珠，推薦吸出178 μL的上清。
            


            5）參考表1向上清中加入第二輪分選磁珠。
            


            6）渦旋混勻或移液器吹打10次混勻，室溫靜置5 min。
            


            7）將離心管短暫離心并置于磁力架中，待溶液澄清后（約5 min），小心移除上清。
            


            8）保持離心管始終處于磁力架中，加入200 μL新鮮配制的80%乙醇漂洗磁珠，室溫孵育30 s，小心移除上清。
            


            9）重復(fù)步驟8。
            


            10）保持離心管始終處于磁力架中，開蓋干燥磁珠至剛剛出現(xiàn)龜裂（約5 min）。
            


            注意：切記磁珠不要干燥時間太久，磁珠干燥過度將影響純化效果。
            


            11）將離心管從磁力架中取出，加入適量ddH2O（≥20 μL），渦旋振蕩或使用移液器輕輕吹打充分混勻，室溫孵育5 min。
            


            12）將離心管短暫離心并置于磁力架中分離磁珠和液體。待溶液澄清后（約5 min），小心吸取上清至干凈的管中，即完成分選。
            


            3. DNA片段分選參考條件
            


            通過超聲法將小牛胸腺DNA進行片段化，制備100-1000 bp的Smear片段，根據(jù)表1進行雙輪分選。結(jié)果使用Agilent 2100 Bioanalyzer進行分析（圖2）。
            


            表1磁珠文庫分選推薦比例
            


            
	
		
            
			
			
            DNA片段大小
            
			            		
			
			
            250-350 bp
            
			            		
			
			
            320-420 bp
            
			            		
			
			
            450-550 bp
            
			            		
			
			
            550-700 bp
            
			            		
			
			
            700-900 bp
            
			            		
			
			
            800-1000 bp
            
			            		
		
            
		
            
			
			
            第一輪體積比（Beads:DNA）
            
			            		
			
			
            0.80×
            
			            		
			
			
            0.70×
            
			            		
			
			
            0.60×
            
			            		
			
			
            0.55×
            
			            		
			
			
            0.50×
            
			            		
			
			
            0.45×
            
			            		
		
            
		
            
			
			
            第二輪體積比（Beads:DNA）
            
			            		
			
			
            0.20×
            
			            		
			
			
            0.20×
            
			            		
			
			
            0.20×
            
			            		
			
			
            0.15×
            
			            		
			
			
            0.15×
            
			            		
			
			
            0.15×
            
			            		
		
            
	            

            


            注：表中“×”表示樣品DNA體積。如文庫插入片段長度為250 bp，樣品DNA體積為100mL，則第一輪分選磁珠使用體積為0.80×100 mL=80 mL；第二輪分選磁珠使用體積為0.20×100 mL=20 mL。
            


            


            圖2 Agilent 2100 high sensitivity DNA chip electopherogram
            


            Smear fragments溶于ddH2O，使用0.80×/0.20×至0.45×/0.15×磁珠進行片段分選
            


             
            


            HB240401
            


             
            

               
             
             
             
             
             
             
             
            400-6111-883