產(chǎn)品描述

X-α-Gal是一種酵母半乳糖苷酶 (MEL1) 的顯色底物，用于在培養(yǎng)基上直接檢測(cè)GAL4系統(tǒng)的酵母雙雜交作用。通過(guò)藍(lán)白顏色篩選，快速和簡(jiǎn)便地識(shí)別陽(yáng)性的藍(lán)色克隆，無(wú)需費(fèi)時(shí)的β-半乳糖苷酶報(bào)告基因檢測(cè)。

X-α-Gal檢測(cè)酵母MEL1基因的激活。MEL1是GAL4酵母雙雜交系統(tǒng)的一個(gè)報(bào)告基因，編碼分泌型的α-半乳糖苷酶。該酶可水解無(wú)色的X-α-Gal底物并最終產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物。表達(dá)α-半乳糖苷酶的酵母菌落在含有X-α-Gal的培養(yǎng)基上顯藍(lán)色，即陽(yáng)性的雙雜交作用。

產(chǎn)品用途

1）α-半乳糖苷酶的顯色底物，形成藍(lán)色沉淀。在培養(yǎng)基上直接檢測(cè)酵母雙雜交相互作用，利用此底物可以省去雙雜交體系中的β-半乳糖苷酶溶液和filter-lift assays；

2）用于區(qū)分腸桿菌科內(nèi)的不同菌種以及區(qū)分雙歧桿菌和乳酸菌；

3）在組織化學(xué)中用于酶活性的檢測(cè)。

運(yùn)輸與保存方法

冰袋運(yùn)輸。-20℃保存，有效期1年。

使用方法

一、涂布于預(yù)制平板：

1）溶解24 mg X-α-gal于6 mL DMF，終濃度為4 mg/ mL。

2）涂布200 μL(15 cm) 或者100 μL（10 cm）X-α-gal 儲(chǔ)存液于預(yù)制平板上；

3）置于37℃培養(yǎng)箱至液體被吸收（由于DMF揮發(fā)性低，最長(zhǎng)可放4小時(shí)）；
4） 將轉(zhuǎn)化細(xì)菌或酵母涂于平板上，于37℃或30℃培養(yǎng)直至藍(lán)色菌落出現(xiàn)。

二、直接加入瓊脂中：

1）溶解60 mg X-α-gal于3 mL DMF，終濃度為20 mg/ mL。

2）將已滅菌瓊脂培養(yǎng)基冷卻至50-55℃；

3）向上述培養(yǎng)基中加入20 mg/ mL X-α-Gal，比例為每升培養(yǎng)基中加入1 mL X-α-Gal溶液。

注意事項(xiàng)

1）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
2）本產(chǎn)品僅作科研用途！

HB210802