產(chǎn)品簡介

 

2×Hieff^® PCR Master Mix是即用型的常規(guī)PCR預(yù)混合溶液，含有Taq DNA Polymerase、dNTP混合物、MgCl₂以及優(yōu)化的緩沖體系。反應(yīng)時只需加入引物和模板即可進(jìn)行擴(kuò)增，大大簡化實驗的操作步驟。本產(chǎn)品中含有優(yōu)良的穩(wěn)定劑，在4℃條件下以放置3個月。PCR產(chǎn)物具有3’-dA突出端，可輕松克隆至T載體。

 

儲存條件

 

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用說明

 

組分	體積 (μL)		循環(huán)步驟	溫度 (°C)	時間	循環(huán)數(shù)
模板DNA	適量		預(yù)變性	94	5 min	1
Primer 1 (10 μM)	2		變性	94	30 sec	35
Primer 2 (10 μM）	2		退火	50-60	30 sec
2×Hieff® PCR Master Mix	25		延伸	72	30 sec/kb
ddH2O	to 50		終延伸	72	10 min	1
表1 擴(kuò)增體系（50 μL）			表2 擴(kuò)增條件

【注】：使用前請務(wù)必將其徹底混勻。

1）模板使用量：基因組DNA：50-200 ng；質(zhì)粒DNA：0.1-10 ng。

2）Mg²⁺濃度：本產(chǎn)品中含有3 mM的MgCl₂，適合大部分PCR反應(yīng)。

3）退火溫度：請參考引物的理論Tm值，退火溫度可設(shè)置低于引物理論值2-5℃。

4）延伸時間：分子鑒定建議30 sec/kb。基因克隆建議60 sec/kb，以保證產(chǎn)物量達(dá)到最高。

 

注意事項

 

1.本產(chǎn)品PCR產(chǎn)物不適用于聚丙烯酰胺凝膠電泳。

2.為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

3.本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

應(yīng)用實例

 

圖1：2×Hieff^® PCR Master Mix擴(kuò)增1.2 kb片段。產(chǎn)品分別在-20℃放置1年，4℃放置3個月，25℃放置1個月后均可有效擴(kuò)增目的片段。模板：擬南芥基因組；退火溫度：60℃；延伸時間：40 sec。

Ver.CN20230901