2×Hieff^® Ultra-Rapid HotStart PCR Master Mix (with Dye)基于改造的Taq DNA Polymerase，添加強力延伸因子、擴增增強因子以及優(yōu)化的緩沖體系，具有超高的擴增效率。3 kb以內(nèi)基因組等復雜模板擴增速度可達1-3 sec/kb，5 kb以內(nèi)質(zhì)粒等簡單模板擴增速度可達1 sec/kb，本產(chǎn)品可大幅節(jié)省PCR反應時間。同時，Mix中含有dNTP、Mg²⁺，使用時只需加入引物和模板即可進行擴增，也大大簡化了實驗的操作步驟。此外，Mix中含有電泳指示染料，可在反應結(jié)束后直接進行電泳，使用方便。體系中加入的保護劑使得本產(chǎn)品經(jīng)過反復凍融后仍可保持穩(wěn)定的活性。PCR產(chǎn)物的3’端帶A，可輕松克隆至T載體。

 

儲存條件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用說明

組分	體積 (μL)		循環(huán)步驟	溫度 (°C)	時間	循環(huán)數(shù)
模板DNA*	適量		預變性	94	3 min	1
Primer正向 (10 μM)	2.5		變性	94	10 sec	28-35
Primer反向 (10 μM）	2.5		退火***	60	20 sec
2×Hieff® Ultra-Rapid HotStart PCR Master Mix (with Dye)**	25		延伸****	72	1-10 sec/kb
ddH2O	to 50		終延伸	72	5 min	1
表1 擴增體系（50 μL）			表2 擴增條件

*不同模板的推薦使用量：

模板種類	片段使用量范圍（50 μL反應體系）
基因組DNA或大腸桿菌菌液	10–1,000 ng
質(zhì)?；虿《?/font>DNA	0.5-50 ng
cDNA	1-5 µL(不超過PCR反應總體積的1/10)

表3 不同模板的推薦使用量

**試劑使用：使用前要充分解凍混勻。

***退火溫度：退火溫度為通用Tm值，也可設(shè)置低于引物Tm值1-2℃。

****延伸速度：1 kb以內(nèi)的基因組、大腸桿菌等復雜模板可設(shè)置1 sec/kb，1-3 kb基因組、大腸桿菌等復雜模板可設(shè)置3 sec/kb，3 kb以上基因組、大腸桿菌等復雜模板可設(shè)置10 sec/kb。5 kb以內(nèi)的質(zhì)粒等簡單模板可設(shè)置1 sec/kb，5-10 kb質(zhì)粒等簡單模板可設(shè)置5 sec/kb，10 kb以上質(zhì)粒等簡單模板可設(shè)置10 sec/kb。

 

注意事項

1.為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

2.本產(chǎn)品僅作科研用途！

 

Ver.CN20230822