口碑款-快速通用Hifair? Lyo Multiplex One Step RT-qPCR Kit
批量采購(gòu)， 請(qǐng)點(diǎn)擊詢價(jià)
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Hifair® Lyo Multiplex One Step RT-qPCR Kit是以 RNA 為模板進(jìn)行多重定量 PCR 反應(yīng)的試劑盒。在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，逆轉(zhuǎn)錄和定量 PCR 在同一反應(yīng)管中進(jìn)行，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)操作，降低了污染的風(fēng)險(xiǎn)。獨(dú)特的 Buffer和酶的設(shè)計(jì)，可用于一步法 RT-qPCR 凍干反應(yīng)體系的配制和產(chǎn)品設(shè)計(jì)。
本試劑盒利用耐熱 Hifair® V Reverse Transcriptase 高效合成第一鏈 cDNA，并利用 UNICON® HotStart Taq DNA
Polymerase 進(jìn)行定量擴(kuò)增。本試劑盒主要包含優(yōu)化的凍干 Buffer，Enzymes Mix 等，并添加了有效抑制非特異性 PCR 擴(kuò)
增的因子和提升多重 qPCR 反應(yīng)擴(kuò)增效率的因子，能夠在保證引物擴(kuò)增效率的同時(shí)，進(jìn)行多重?zé)晒舛繑U(kuò)增反應(yīng)。
本試劑盒中匹配了凍干保護(hù)劑，可以用于凍干。
產(chǎn)品信息
|
貨號(hào) |
11831ES60 / 11831ES80 / 11831ES92 |
|
規(guī)格 |
100 T / 1000 T / 10000 T |
組分信息
|
組分編號(hào) |
組分名稱 |
11831ES60(100 T) |
11831ES80(1000 T) |
11831ES92(10000 T) |
|
11831-A |
4×Hifair® Lyo-Buffer |
600 μL |
6 mL |
60 mL |
|
11831-B |
Hifair® Lyo-Enzyme Mix |
100 μL |
1 mL |
10 mL |
|
11831-C |
凍干保護(hù)劑 |
800 μL |
8 mL |
80 mL |
【注】1) 4×Hifair® Lyo-Buffer 為 Lyo Multiplex One Step RT-qPCR kit 的簡(jiǎn)寫(xiě)。
2) Hifair® Lyo-Enzyme Mix 主要包含有耐熱 Hifair® V Reverse Transcriptase 和 UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。
運(yùn)輸條件
1. 保存方式：
Part 1： 11831-A【 4×Hifair® Lyo-Buffer 】、11831-C【 凍干保護(hù)劑 】，-25~-15℃ 保存，有效期 1 年。
Part 2： 11831-B【 Hifair® Lyo-Enzyme Mix 】，2~8℃ 保存，有效期 6 個(gè)月。
- 運(yùn)輸方式：冰袋運(yùn)輸。
使用方法
- 反應(yīng)體系（以25uL體系為例）
|
組分 |
體積（μL） |
終濃度 |
|
4×Hifair® Lyo-Buffer |
6 |
1x |
|
Hifair® Lyo-Enzyme Mix |
1 |
- |
|
凍干保護(hù)劑 |
8 |
- |
|
Primer Mix(10μM) |
1 |
0.1-1 uM |
|
Probe Mix(10μM) |
0.5 |
0.05-0.5 uM |
|
模板RNA |
5 |
- |
|
DEPC H20 |
up to 25 |
- |
- 參考擴(kuò)增程序
1）常規(guī)擴(kuò)增程序
|
循環(huán)步驟 |
溫度 |
時(shí)間 |
循環(huán)數(shù) |
|
逆轉(zhuǎn)錄 |
50℃a |
10 min |
1 |
|
預(yù)變性 |
95℃ |
5 min |
1 |
|
擴(kuò)增反應(yīng) |
95℃ |
|
45 |
|
60℃b |
30 secc |
2）快速擴(kuò)增程序
|
循環(huán)步驟 |
溫度 |
時(shí)間 |
循環(huán)數(shù) |
|
逆轉(zhuǎn)錄 |
50℃a |
2 min |
1 |
|
預(yù)變性 |
95℃ |
2 sec |
1 |
|
擴(kuò)增反應(yīng) |
95℃ |
|
45 |
|
60℃b |
13 secc |
【注】a. 逆轉(zhuǎn)錄：42℃或者50℃均可。
b. 擴(kuò)增反應(yīng)：擴(kuò)增反應(yīng)溫度根據(jù)設(shè)計(jì)的引物Tm值進(jìn)行調(diào)整。
c. 熒光信號(hào)采集：不同的qPCR檢測(cè)儀器所需的熒光信號(hào)采集時(shí)間不同，請(qǐng)根據(jù)最短時(shí)間限制進(jìn)行設(shè)置。
- 適用機(jī)型
ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex；
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™；
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™；
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000；
Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96；
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR
注意事項(xiàng)
1. 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)使用RNase free耗材。
2. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
