急性胰腺炎(Acute pancreatitis, AP)是臨床上常見的急腹癥，病因復雜，病死率達5%~10%，重癥AP死亡率高達20%~30%，目前發(fā)病機制尚未闡述，無特殊治療方式。目前活體AP動物模型制作常用方法大致有胰管結(jié)扎法、十二指腸閉袢法、胰膽管穿刺注射法、胰腺被膜下注射法、胰膽管注射法結(jié)合靜脈輸注法、蛙皮素聯(lián)用脂多糖腹腔內(nèi)注射法等。
?；悄懰徕c（Taurocholic acid Sodium Salt）容易通過逆行灌注胰腺，模擬膽汁反流，損傷胰腺，誘導重癥急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）。通過激活NF-κB途徑，引起肺損傷。逆行胰膽管灌注牛黃膽酸鈉是一種經(jīng)典的重癥急性胰腺炎的造模途徑。
圖1 ?；悄懰徕c分子結(jié)構(gòu)(CAS NO.145-42-6）
牛黃膽酸鈉誘導胰腺炎建模步驟（僅供參考）
動物：
牛磺膽酸鈉可以誘導大多數(shù)動物發(fā)生AP，但是此類模型主要應(yīng)用于嚙齒類動物（如大鼠和小鼠）。
給藥方式：
?；悄懰徕c可誘導急性壞死胰腺炎，這種模型多伴有多器官功能衰竭，適用于研究AP的局部和全身并發(fā)癥，用于臨床膽汁反流性胰腺炎的發(fā)病機制及藥物治療療效的研究，可為研究SAP的靶向治療提供工具。
1、將動物禁食過夜，并自由飲用新鮮自來水。通過腹腔注射10%氯醛脲（0.3mL/100g）進行麻醉。
2、動物麻醉后，經(jīng)腸壁穿刺逆行胰膽管注射，正中切口開腹，輕拉出十二指腸，順膽胰管尋找十二指腸開口，使用穿刺針在近十二指腸開口端逆行刺入胰膽管，用動脈夾夾住膽管入肝處。
3、以0.1mL/min速度向胰管內(nèi)勻速注射5%牛磺膽酸鈉溶液（按0.1mL/100g劑量），對照組使用等量生理鹽水替代?；悄懰徕c，注射完畢后留針8-10min，肉眼觀察胰腺顏色變暗紅，拔出穿刺針，松開血管夾，并縫合穿刺的十二指腸壁以免腸液漏至腹腔，確認腹腔無活動性出血后層層縫皮即可。
模型判定指標：
注射后3、6、12、24h檢測血清淀粉酶水平、胰腺組織的濕/干質(zhì)量比率及病理組織學評分，觀察24h生存指數(shù)
模型優(yōu)點：
病因、致病機制及病變與臨床急性出血壞死型胰腺炎(AHNP)相似，成功率高，重復性好，可比性高。但對操作者的技術(shù)熟練度要求較高。
實驗案例
圖2 12小時時胰腺的形態(tài)學變化和每個時間點的胰腺組織學評分（引用自：http://dx.doi.org/10.1155/2015/685043）
實驗采用雄性SPF Wistar大鼠，體重200~250g，穿刺逆行胰膽管注射5%牛磺膽酸鈉溶液誘導SAP，在不同時間點進行胰腺H&E病理切片染色，對胰腺病理進行評分。
相關(guān)產(chǎn)品
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分類 |
產(chǎn)品名稱 |
貨號 |
規(guī)格 |
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胰腺炎建模試劑 |
60321ES03 |
1 mg |
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60398ES03/08/25 |
1/5/25 g |
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61302ES60/76 |
100/500 g |
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其他試劑 |
60372ES76/96 |
500g/25kg |
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60313ES60 |
100 mL |
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60524ES60 |
2×100 mL |
相關(guān)專題
2. L-精氨酸誘導胰腺炎模型（Acute pancreatitis, AP）
