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            首頁(yè) / qPCR系列 / 產(chǎn)品應(yīng)用詳情

            一步完成gDNA去除與反轉(zhuǎn)錄,遠(yuǎn)離污染和降解風(fēng)險(xiǎn)!

            ——Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR

            常見(jiàn)的gDNA消化去除通常在正式反轉(zhuǎn)錄步驟之前,加入gDNA消化去除組分后,需在特定溫度下反應(yīng)一段時(shí)間,反應(yīng)冷卻后再加入相關(guān)的反轉(zhuǎn)錄組分進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,步驟多且耗時(shí)通常在半小時(shí)左右。

            小翌今天給大家?guī)?lái)一款快速反轉(zhuǎn)錄預(yù)混液,gDNA去除和反轉(zhuǎn)錄一步完成,且只要5分鐘,“咻”的一下,就可拿到想要的cDNA啦!

             

             
             

             

            在檢測(cè)基達(dá)水平時(shí),RNA樣品中的基因組DNA(gDNA)殘留是一個(gè)潛在的風(fēng)險(xiǎn)。gDNA可能會(huì)與目的RNA共同擴(kuò)增,從而產(chǎn)生假陽(yáng)性的現(xiàn)象,例如Ct值偏小、Ct值波動(dòng)以及熔解曲線雙峰。

            ▲ Ct值偏小/Ct值波動(dòng)

             

            如何避免RNA中殘留的gDNA帶來(lái)的干擾呢?通常情況下,我們可以選用帶gDNA去除的RNA提取試劑獲取高質(zhì)量的RNA或是針對(duì)提取的RNA在反轉(zhuǎn)錄時(shí)進(jìn)行g(shù)DNA消化去除處理。

             

             

             
            產(chǎn)品名稱(chēng)
             

            Hifair® AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix for qPCR(Cat #11151ES)

             

             

             
            產(chǎn)品特點(diǎn)
             
             

            一步完成:一步完成gDNA去除和反轉(zhuǎn)錄;
            快速反應(yīng):消化&反轉(zhuǎn)僅需5分鐘;
            高效合成:可保證100 pg RNA反轉(zhuǎn)錄;
            產(chǎn)物穩(wěn)定:cDNA產(chǎn)物可長(zhǎng)久穩(wěn)定保存。

             

             

             
            產(chǎn)品性能
             
             
            反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)量高
             
             

            圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板,分別檢測(cè)三種基因。品牌A、品牌B、品牌C均為一步gDNA去除&反轉(zhuǎn)錄試劑。測(cè)試結(jié)果顯示,在1 μg和10 ng Total RNA 投入下,11151ES反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量均優(yōu)于其他品牌,Ct值更小。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

             

            圖. 以擬南芥RNA為模板,品牌A、品牌B、品牌C均為一步gDNA去除&反轉(zhuǎn)錄試劑。測(cè)試結(jié)果顯示,在1 μg和10 ng Total RNA 投入下,11151ES反轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)量均優(yōu)于其他品牌,Ct值更小。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

             

             
            優(yōu)異的靈敏度
             
             

            圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板,擴(kuò)增30%GC、50%GC、60%GC和70%GC的基因。分別投入100 pg、1 ng、10 ng、100 ng、1 μg的Total RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄并進(jìn)行熒光定量檢測(cè)。結(jié)果顯示,11151ES可滿(mǎn)足100 pg-1 μg RNA的反轉(zhuǎn)錄。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

             

             
            cDNA產(chǎn)物穩(wěn)定性好
             
             

            圖.以人293T細(xì)胞RNA為模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,將獲得的cDNA產(chǎn)物進(jìn)行反復(fù)凍融,分別凍融10次、20次、30次。測(cè)試結(jié)果顯示11151ES反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA產(chǎn)物在30次反復(fù)凍融處理后,仍保持高度的穩(wěn)定性,Ct值差異不大。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

             

            圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,將獲得的cDNA產(chǎn)物在-20℃、4℃、25℃和37℃的溫度條件下放置7天。測(cè)試結(jié)果顯示11151ES反轉(zhuǎn)錄得到的cDNA產(chǎn)物在不同溫度下存儲(chǔ)7天,仍保持高度的穩(wěn)定性,Ct值差異不大。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

             

             

            試劑盒穩(wěn)定性好

             
             

            圖. 以人293T細(xì)胞RNA為模板,將分別在-20℃、4℃和37℃的溫度條件下放置3天和7天的試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。測(cè)試結(jié)果顯示不同溫度不同時(shí)間放置下的11151ES反轉(zhuǎn)錄結(jié)果差異不大,試劑盒具有良好的穩(wěn)定性。(配套測(cè)試用熒光定量試劑為11184ES)

             

             
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            方法

            分類(lèi)

            產(chǎn)品名稱(chēng)

            貨號(hào)

            RNA提取

            同Trizol提取

            TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent

            10606ES

            免氯仿升級(jí)版

            TRIeasy™ Total RNA Extraction Reagent(Tcm Free)

            19202ES

            動(dòng)物組織/細(xì)胞總RNA提取,避開(kāi)有毒試劑,最快15 min完成

            MolPure® Cell/Tissue Total RNA Kit細(xì)胞/組織總RNA提取試劑盒

            19221ES

            qPCR染料法

            高靈敏通用型定量預(yù)混液(染料法)

            Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Master Mix

            11184ES

            超高性?xún)r(jià)比定量預(yù)混液 (染料法),已發(fā)文章累計(jì)IF達(dá)到5000+

            Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (No Rox)

            11201ES

            Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (Low Rox)

            11202ES

            Hieff® qPCR SYBR Green Master Mix (High Rox)

            11203ES

            反轉(zhuǎn)錄試劑

            5 min快速反轉(zhuǎn),最長(zhǎng)可滿(mǎn)足14 kb cDNA合成,含gDNA去除(下游應(yīng)用PCR/qPCR)-示蹤版New

            Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit

            11149ES

            5 min快速反轉(zhuǎn),最長(zhǎng)可滿(mǎn)足14 kb cDNA合成,含gDNA去除(下游應(yīng)用PCR/qPCR)-常規(guī)版New

            Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit(No Dye)

            11150ES

            高質(zhì)量第一鏈cDNA合成預(yù)混液,含gDNA去除(下游應(yīng)用qPCR)

            Hifair® III 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA digester plus)

            11141ES

            400-6111-883