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            首頁(yè) / 細(xì)胞培養(yǎng) / 產(chǎn)品應(yīng)用詳情

            動(dòng)物組織消化膠原酶的選擇指南

            ——動(dòng)物組織消化利器

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            圖1:膠原酶

            產(chǎn)品介紹

             

            膠原酶(Collagenase)是一類能夠特異性的識(shí)別Pro-X-Gly-Pro序列(該序列高頻率出現(xiàn)在膠原中,很少發(fā)現(xiàn)于其他蛋白中),并切割該序列中的中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之間的肽鍵的肽鏈內(nèi)切酶,且能夠水解結(jié)締組織中的膠原蛋白。

            許多蛋白酶都能水解單鏈和變性的膠原多肽,但膠原酶是唯一一種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋白酶,其廣泛存在結(jié)締組織內(nèi),其中有效的膠原酶是由厭氧細(xì)菌溶組織梭菌(Clostridium histolyticum)分泌的“粗”膠原酶。

            翌圣膠原酶來(lái)源于溶組織梭菌(Clostridium histolyticum),是一種酶“粗”提物,不僅含有能夠降解天然膠原和網(wǎng)狀纖維的膠原酶,還含有其他的一些蛋白酶如多糖酶、脂酶等,能夠有效水解結(jié)締組織和上皮組織細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)的其他蛋白、多糖和脂質(zhì)等,因此更適用于組織消化。

            目前市面上的細(xì)菌膠原酶依據(jù)膠原酶的活性差異主要分為5種類型:膠原酶I型,II型,III型,IV型和V型等。

             

            膠原酶的選擇

             

            產(chǎn)品名稱

            外觀

            酶活

            應(yīng)用范圍

            膠原酶I(Type I Collagenase)

            棕色或棕褐色結(jié)晶性粉末

            ≥125 U/mg solid

            包含(膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶)活性,用于上皮、肺,脂肪和腎上腺組織細(xì)胞的分離。

            膠原酶II(Type II Collagenase)

            棕色或棕褐色結(jié)晶性粉末

            ≥125 U/mg solid

            含更多的梭菌蛋白酶活性,適用于肝臟,骨,甲狀腺,心臟和唾液腺組織細(xì)胞的分離

            膠原酶III(Type III Collagenase)

            棕色或棕褐色結(jié)晶性粉末

            ≥100 U/mg solid

            含低蛋白水解活性,對(duì)消化組織中連接部分較為有效,常用于哺乳動(dòng)物組織細(xì)胞解離

            膠原酶IV(Type IV Collagenase)

            棕色或棕褐色結(jié)晶性粉末

            ≥125 CDU/mg solid*

            含低胰酶活性,常用于胰島和受體完整性的細(xì)胞制備

            膠原酶V(Type V Collagenase)

            棕色或棕褐色結(jié)晶性粉末

            ≥125 CDU/mg solid*

            含至少7中蛋白酶成分,可用于胰腺小島組織的分離,將結(jié)締組織分離成單個(gè)細(xì)胞

            *CDU = collagen digestion units

             

            產(chǎn)品特性

             

            1、消化效率高:溶組織梭菌的酶粗提物,對(duì)組織消化效率高。

            2、依賴于活化劑:膠原酶需要借助二價(jià)陽(yáng)離子如Ca2+、 Zn2+等活化酶的活性。

            3、受抑制劑影響:膠原酶的抑制劑有EDTA 、EGTA等;二是重金屬離子(Hg2+,Pb2+,Cd2+);還有一些化學(xué)試劑如Cysteine、histidine、DTT、2-mercaptoethanol、o-phenanthroline等對(duì)膠原酶也有抑制作用。

            4、耐干擾性強(qiáng):膠原不會(huì)受到培養(yǎng)細(xì)胞所用的血清影響。

             

            更具競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格

             

            圖片1.png

            圖2:價(jià)格對(duì)比圖

             

            FAQ

             

            一、使用方法:在Hank’s,Earle’s 或者其他平衡鹽溶液中溶解,推薦使用工作濃度0.05 % ~0.5 % (w/v) 

            二、存儲(chǔ)溫度: 2-8℃

            三、 使用建議:

            ①對(duì)于膠原蛋白結(jié)構(gòu)和生物合成研究,常使用更高純度的膠原酶制劑,不含其他蛋白水解活性。

            ②對(duì)于組織解離,常使用粗制膠原酶制劑,例如彈性蛋白酶,胰蛋白酶或木瓜蛋白酶等。

            四、常見(jiàn)問(wèn)題:

            1、實(shí)驗(yàn)過(guò)程中消化作用不佳

            如果是酶活不強(qiáng)或鈣離子不足導(dǎo)致,應(yīng)在低溫干燥條件下儲(chǔ)存膠原酶,膠原酶溶液分裝后凍存

            ②如果是鈣離子不足導(dǎo)致,應(yīng)將膠原酶溶液中鈣離子濃度設(shè)置為5mM。

            2、使用過(guò)程中出現(xiàn)細(xì)胞死亡

            如果是蛋白酶過(guò)量,應(yīng)減少蛋白酶接觸時(shí)間或是加入白蛋白或滅活血清

            如果是pH 改變應(yīng)使用緩沖液(如HBSS);經(jīng)常檢查并重新調(diào)節(jié)pH

            如果氧氣太少,應(yīng)給消化液通無(wú)菌空氣

            3、實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)細(xì)胞受損

            如果是蛋白酶過(guò)多導(dǎo)致,應(yīng)減少蛋白酶用量或是加入白蛋白或滅活血清

            訂購(gòu)信息

             

            貨號(hào)

            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            價(jià)格(元)

            40507ES60

            Collagenase I 膠原酶I型

            100mg

            279.00

            40508ES60

            Collagenase II 膠原酶II型

            100mg

            279.00

            40509ES60

            Collagenase III 膠原酶III型

            100mg

            528.00

            40510ES60

            Collagenase IV膠原酶IV型

            100mg

            279.00

            40511ES60

            Collagenase V膠原酶V型

            100mg

            528.00

             

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            產(chǎn)品名稱

            規(guī)格

            價(jià)格(元)

            40130ES76

            Fetal Bovine Serum Origin South America Gold 胎牛血清(南美特級(jí))

            500mL

            3287.00

            40126ES60

            Trypsin (0.25%),phenol red 胰酶溶液(0.25%),含酚紅

            100mL

            88.00

            40127ES60

            Trypsin-EDTA (0.25%),phenol red 胰酶-EDTA溶液(0.25%),含酚紅

            100mL

            88.00

            40104ES60

            Dispase II 分散酶II

            100mg

            768.00

            40506ES60

            ACCUTASE™ 細(xì)胞消化液

            100mL

            389.00

             

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