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            首頁 / 病原檢測 / 產品應用詳情

            非洲豬瘟病毒檢測科普知識

            什么是非洲豬瘟

            非洲豬瘟(African SwineFever,ASF)是由非洲豬瘟病毒(African Swine FeverVirus,ASFV)引起豬的一種急性、烈性、高度接觸性傳染病。非洲豬瘟的發(fā)病率和死亡率可達100%,嚴重危害著全球養(yǎng)豬業(yè),造成難以估量的經濟損失。世界動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為法定報告動物疫病,我國將其列為一類動物疫病。

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            溫馨提示

            1、非洲豬瘟不是人畜共患病,雖然對豬有致命危險,但對人沒有危害。

            2、豬肉可以安全食用。一方面疫區(qū)的所有生豬均會被撲殺并無害化處理,理論上買不到被非洲豬瘟病毒感染的豬肉。另一方面非洲豬瘟病毒在高溫下容易被破壞,當溫度達55℃持續(xù)30min或60℃持續(xù)10min,非洲豬瘟病毒可以被殺滅。

            非洲豬瘟診斷技術

            目前非洲豬瘟沒有疫苗和有效的治療手段,主要通過實驗室診斷方法對非洲豬瘟進行監(jiān)控和控制。非洲豬瘟病毒實驗室診斷技術包括病原學檢測技術和血清學檢測技術,詳見下圖(圖1)。在所有的檢測技術中,最受關注的熒光定量PCR(qPCR)法。qPCR法是OIE推薦使用的非洲豬瘟常規(guī)診斷的重要工具,也是中國在目前非洲豬瘟流行情況下常用檢測技術。

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            圖1:非洲豬瘟病毒實驗室診斷技術。參考聯(lián)合國糧食及農業(yè)組織(FAO)《動物生產及動物衛(wèi)生手冊》。

            非洲豬瘟病毒qPCR檢測操作流程

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            樣本采集

            樣本來源包括:

            樣本采集時應注意穿戴個人生物安全防護裝備,實施現(xiàn)場消毒和廢棄物處理。

            1)活豬:血液,扁桃體液等液體樣品。

            2)病死豬:脾、肺、腎、淋巴結、肌肉等組織樣品。

            3)周邊環(huán)境:飼料、車輛、糞便、污水、欄舍等均周邊環(huán)境樣品。


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            圖2:非洲豬瘟檢測樣本。

            病毒核酸提取

            病毒核酸提取前,一般血液、扁桃體液等液體樣品不需處理,直接用病毒核酸提取試劑盒提取樣品gDNA,對于耐抑制性能較強的qPCR試劑,也可以直接取液體樣品進行下游qPCR實驗。但組織樣品在進行病毒核酸提取前,需要進行研磨裂解處理。

            病毒核酸提取具體操作可參照所用病毒核酸提取試劑盒說 明書。

            qPCR檢測

            qPCR檢測步驟包括配制qPCR反應體系和加樣上機檢測。每次檢測試驗都需要設立陽性對照和陰性對照組。具體操作可參照所用qPCR試劑盒說明書。

            結果分析

            1、質控標準

            1)陰性對照的Ct值應>38或無Ct值。

            2)陽性對照的Ct值應≤35,并出現(xiàn)典型的擴增曲線。

            3)若陰性和陽性對照不滿足以上條件,此次實驗視為無效。

            2、樣品結果判定

            1)陰性:檢測樣品的Ct值>38或無Ct值,表明樣品為陰性。

            2)陽性:檢測樣品的Ct值≤35,且出現(xiàn)典型的擴增曲線,表示樣品為陽性。

            3)可疑:檢測樣品的35<Ct值≤38,且出現(xiàn)典型的擴增曲線,應重檢,重檢仍出現(xiàn)上述結果的判為陽性,否則判為陰性。

            非洲豬瘟檢測的意義

            1)確診發(fā)病豬是否感染非洲豬瘟病毒,沒有感染,采取治療和綜合防控措施。感染非洲豬瘟溫度則需立即上報,進行無害化處理。

            2)通過檢測確定進場原料、水、物品、豬只、車輛等無非洲豬瘟病毒污染,切斷病原進入豬場。

            3)發(fā)病豬場復養(yǎng)之前進行檢測,檢測和核驗豬場內消毒效果,確定豬場內無非洲豬瘟病毒殘留。

            總之,非洲豬瘟病毒檢測能幫助我們及時確診發(fā)病豬只,完善疫病防控的工作流程,彌補生物安全的漏洞,只有靈活運用檢測工具,結合生物安全的其他手段,才能做好非洲豬瘟的防控工作。

            我們的非洲豬瘟檢測產品

            Hieff Unicon? TaqMan qPCR 系列 

            特異性強、靈敏度高、數(shù)據(jù)準確、兼容多重 qPCR,能準確快速的檢測出非洲豬瘟病毒。

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            圖3:進行三重qPCR檢測,擴增效率接近100%,靈敏度低至pg級別。


            客戶反饋 

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            圖4:以豬血液gDNA為模板,NTC無擴增不起峰,14個非洲豬瘟樣本均能有效檢測,結果為陽性。

            定制服務

            為滿足您的個性化需求,我們的熒光定量產品可以為您量身定制!

            1)我們可根據(jù)您的項目需求進行產品開發(fā)與優(yōu)化。

            2)我們可提供無甘油的酶原料,方便將試劑制作成凍干粉形式,用于常溫運輸保存。

            3)我們可根據(jù)您的反應體系的不同提供相應濃度的預混試劑,無需二次稀釋,只需加入引物探針即可。

            點擊定制

            相關產品

            檢測方法

            產品名稱

            貨號

            規(guī)格

            定量PCR

            Hieff? HotStart Taq DNA Polymerase(配體法熱啟動DNA聚合酶)

            10110ES72

            250 U

            Hieff UNICON? HotStart Taq DNA Polymerase(抗體法熱啟動Taq酶)

            10113ES60

            100 U

            Hieff Unicon? qPCR TaqMan Probe Master Mix(單重)

            11205ES08

            5 mL

            Hieff Unicon? TaqMan multiplex qPCR master mix(多重)

            11208ES08

            5 mL

            等溫擴增

            Bst II DNA polymerase

            12908ES60

            1600 U

            400-6111-883