在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，“黑膠蟲(chóng)”污染常常成為一大難題，“黑膠蟲(chóng)”及其分解的復(fù)合物是一種細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí)常見(jiàn)的細(xì)胞污染物。它在普通倒置顯微鏡的低倍鏡下呈現(xiàn)點(diǎn)狀或碎片狀的黑色顆粒，在高倍鏡下可看到這些黑色顆粒進(jìn)行原地振動(dòng)（類(lèi)似布朗運(yùn)動(dòng)）。想要告別黑膠蟲(chóng)污染，首先需要準(zhǔn)確識(shí)別污染類(lèi)型。一旦確認(rèn)為黑膠蟲(chóng)污染，便可以采取相應(yīng)的措施，使用黑膠蟲(chóng)清除劑（60725ES）來(lái)解決問(wèn)題。
判斷黑膠蟲(chóng)污染的方法
培養(yǎng)基不渾濁，但在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞周?chē)团囵B(yǎng)液中有很多小黑點(diǎn)，且隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)小黑點(diǎn)逐漸增多，更換培養(yǎng)基或洗滌細(xì)胞無(wú)效；
培養(yǎng)基中常添加的青霉素、鏈霉素、慶大霉素等抗生素對(duì)其無(wú)效；
可能通過(guò)培養(yǎng)箱空氣進(jìn)行傳染；
黑膠蟲(chóng)與細(xì)胞競(jìng)爭(zhēng)性生長(zhǎng)，使細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，細(xì)胞狀態(tài)差，空泡化嚴(yán)重，甚至還可能導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)的改變。
黑膠蟲(chóng)清除劑的成分與作用
黑膠蟲(chóng)清除劑的主要成分為抗菌素，可以有效的控制和殺滅血清、培養(yǎng)基、細(xì)胞中的黑膠蟲(chóng)，同時(shí)對(duì)常見(jiàn)的細(xì)菌也有一定的清除作用，幾乎不影響細(xì)胞本身的生長(zhǎng)增殖，可最大程度上挽救珍貴細(xì)胞。
黑膠蟲(chóng)清除劑的優(yōu)點(diǎn)
高效清除
黑膠蟲(chóng)清除劑能夠有效控制和殺滅血清、培養(yǎng)基、細(xì)胞中的黑膠蟲(chóng)，同時(shí)對(duì)常見(jiàn)的細(xì)菌也有一定的清除作用。
不影響細(xì)胞生長(zhǎng)
在清除黑膠蟲(chóng)的同時(shí)，幾乎不影響細(xì)胞本身的生長(zhǎng)增殖，保證細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行。
使用方便
可以根據(jù)需要選擇不同的稀釋倍數(shù)，推薦1:500，并按照推薦的比例加入培養(yǎng)基中進(jìn)行處理。
使用方法
準(zhǔn)備階段
使用前請(qǐng)瞬時(shí)離心混勻，用75%乙醇擦拭后放入超凈臺(tái)中，輕輕晃動(dòng)混勻。
稀釋與加入
棄掉舊培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞2-3次，加入新的含有黑膠蟲(chóng)清除劑的完全培養(yǎng)基（推薦稀釋比例為1:500，如5 mL完全培養(yǎng)基中加入10 μL黑膠蟲(chóng)清除劑）。
處理時(shí)間
每2天用以上含有黑膠蟲(chóng)清除劑的完全培養(yǎng)基換液或傳代一次，連續(xù)處理3次，黑膠蟲(chóng)即可明顯消除，若污染較為嚴(yán)重，可延長(zhǎng)處理3-5天。
應(yīng)用效果對(duì)比圖
圖1.黑膠蟲(chóng)清除劑使用前后對(duì)比圖
如圖所示，黑膠蟲(chóng)清除劑能夠有效地清除污染，恢復(fù)細(xì)胞培養(yǎng)的正常狀態(tài)。
注意事項(xiàng)
在使用黑膠蟲(chóng)清除劑時(shí)，還應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室的無(wú)菌操作和環(huán)境控制，以防止新的污染發(fā)生。同時(shí)，對(duì)于嚴(yán)重污染的細(xì)胞培養(yǎng)，可能需要考慮丟棄并重新開(kāi)始，以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。如果污染問(wèn)題持續(xù)存在，可能需要進(jìn)一步調(diào)查污染源，并采取相應(yīng)的預(yù)防措施。
相關(guān)產(chǎn)品推薦
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產(chǎn)品名稱(chēng) |
貨號(hào) |
規(guī)格 |
適用場(chǎng)景 |
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60725ES |
400 μL |
控制和殺滅血清、培養(yǎng)基、細(xì)胞中的黑膠蟲(chóng) |
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60735ES |
100 μL/5 x 100 μL |
清除細(xì)胞類(lèi)芽孢桿菌污染 |
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MycAwayl™ Treatment (1000×) - Mycoplasma Elimination Reagent MycAwayl™ 支原體去除試劑（1000×） |
40607ES |
100 μL/1 mL/5 mL |
支原體去除 |
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Penicillin-Streptomycin (100×), Suitable for Cell culture 細(xì)胞培養(yǎng)用青霉素-鏈霉素（雙抗） |
60162ES |
100 mL |
抑制多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌的生長(zhǎng) |
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60290ES |
100 mL |
對(duì)革蘭陽(yáng)性細(xì)菌和革蘭陰性細(xì)菌具有較好的聯(lián)合抗菌作用 |
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60291ES |
100 mL |
青霉素和鏈霉素抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成，兩性霉素B抑制霉菌生長(zhǎng) |
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60733ES |
100 mL |
細(xì)胞房、實(shí)驗(yàn)室等水浴鍋或培養(yǎng)箱水槽內(nèi)水體中細(xì)菌、真菌、支原體、藻類(lèi)等微生物的抑制和清除 |
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