產(chǎn)品說明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻
白細胞介素6（IL-6）最初被鑒定為B細胞分化因子，現(xiàn)在已知是一種多功能細胞因子，可調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、造血、急性期反應(yīng)和炎癥，其有3個受體結(jié)合位點，包括1個特異性受體IL-6R 結(jié)合位點，和2個gp130結(jié)合位點。IL-6是一種多效性、α螺旋、22-28kDa的糖蛋白，在急性期反應(yīng)、炎癥、造血、骨代謝和癌癥進展中發(fā)揮重要作用，人IL-6與小鼠和大鼠IL-6具有39%的aa序列同一性。它是一種多效性細胞因子，不僅影響免疫系統(tǒng)，還作用于其他生物系統(tǒng)和各種器官的許多生理事件，同時也能誘導骨髓瘤和漿細胞瘤的生長。
翌圣Mouse IL-6 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿中的小鼠白介素6(Mouse IL-6)。特異性抗小鼠白介素6抗體預(yù)包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的小鼠白介素6與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中小鼠白介素6的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產(chǎn)品信息
|
貨號 |
98027ES48 / 98027ES96 |
|
規(guī)格 |
48 T / 96 T |
|
檢測范圍 |
15.63-1000 pg/mL |
|
檢測方法 |
雙抗夾心法 |
|
檢測物種 |
小鼠 |
|
檢測時長 |
4.5小時 |
|
靈敏度 |
9.37 pg/mL |
|
稀釋線性 |
74 - 107% |
|
回收率 |
77 - 111% |
|
板內(nèi)差 |
3.1% |
|
板間差 |
5.7% |
實驗數(shù)據(jù)
- 標曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。
- 靈敏度檢測
IL-6的最低檢測限為9.37 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
- 精密度檢測
酶標板內(nèi)精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內(nèi)重復(fù)測定8次，評估酶標板內(nèi)的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復(fù)檢測24次，評估酶標板間的精密度。
|
項目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
|
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
8 |
8 |
8 |
24 |
24 |
24 |
|
|
平均值 |
614.01 |
165.44 |
39.27 |
622.44 |
161.44 |
42.01 |
|
標準差 |
16.25 |
5.85 |
1.29 |
24.60 |
6.54 |
3.82 |
|
變異系數(shù)（%） |
2.6 |
3.5 |
3.3 |
4.0 |
4.0 |
9.1 |
- 回收率檢測
通過不同水平的IL-6添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
|
樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
94.4 |
85.5-108.6 |
|
血漿 |
96.3 |
81.6-111.1 |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
90.2 |
77.5-102.2 |
- 稀釋線性檢測
|
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
81.6 |
77.8-87.1 |
|
1:04 |
94.4 |
91.3-98.9 |
|
1:08 |
96.8 |
92.7-103.9 |
|
1:16 |
97.6 |
88.5-103.6 |
|
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
94.5 |
84.0-107.2 |
|
1:04 |
96.2 |
88.9-100.2 |
|
1:08 |
102.3 |
99.0-106.7 |
|
1:16 |
82.2 |
74.4-92.5 |
|
細胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
86.3 |
82.5-89.6 |
|
1:04 |
95.4 |
93.3-98.1 |
|
1:08 |
97.7 |
91.7-102.7 |
|
1:16 |
97.2 |
96.0-99.4 |
- 樣本值
應(yīng)用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
|
樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（pg/mL） |
樣本值（pg/mL） |
|
血清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
|
血漿 |
8 |
33.6 |
n.d.-59.0 |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得15.63 pg/mL
- 測定特異性
本試劑盒識別天然和重組小鼠白介素6。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
|
Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
||
|
IL-1α |
IL-8 |
IL-1α |
IL-10 |
|
IL-1β |
IL-10 |
IL-1β |
IL-12 |
|
IL-2 |
IL-12 |
IL-2 |
IFN-γ |
|
IL-4 |
IFN-γ |
IL-4 |
VEGF |
|
IL-5 |
VEGF |
IL-5 |
TNF-α |
|
IL-6 |
TNF-α |
|
|
檢測簡圖
疑問解答
|
問題 |
造成原因 |
解決方法 |
|
標曲不好 |
移液量不準確 |
檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
|
稀釋方法不恰當 |
||
|
顯色值偏低 |
孵育時間太短 |
給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
|
移液量不足或稀釋不當 |
校準移液器和規(guī)范操作 |
|
|
CV偏高 |
酶標板清洗不當 |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
|
受污染的洗液 |
準備新鮮洗液 |
|
|
靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當 |
按照產(chǎn)品組分表進行保存。 |
