腫瘤壞死因子α（TNF-α），也稱為惡病質(zhì)素，又名TNFSF1A，是一種多效細(xì)胞因子，在炎癥、細(xì)胞凋亡和免疫系統(tǒng)發(fā)育中起核心作用，可由多種免疫細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生。TNF-α受體主要是TNFR1和TNFR2，其信號(hào)可以激活caspase 8、轉(zhuǎn)錄因子NF-κB和激酶JNK等。人TNF-α的氨基酸組成與小鼠TNF-α有79%的同源性，TNF-α的生物學(xué)功能似乎沒有明顯的種屬特異性。研究表明TNF-α一方面對(duì)某些類型的感染具有抵抗力，另一方面又引起炎癥，在病理過程中起著矛盾的作用。TNF-α也可能影響葡萄糖攝取與胰島素抵抗密切相關(guān)。同時(shí)TNF-α在腫瘤增殖、遷移、侵襲和血管生成中也起著關(guān)鍵作用。

翌圣Mouse TNF-α ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒，用于定量測(cè)定血清、血漿中的小鼠腫瘤壞死因子α(Mouse TNF-α)。特異性抗小鼠腫瘤壞死因子α抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的小鼠腫瘤壞死因子α與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測(cè)抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中小鼠腫瘤壞死因子α的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。

 

產(chǎn)品信息

貨號(hào)	98029ES48 / 98029ES96
規(guī)格	48 T / 96 T
檢測(cè)范圍	31.25-2000 pg/mL
檢測(cè)方法	雙抗夾心法
檢測(cè)物種	小鼠
檢測(cè)時(shí)長(zhǎng)	4.5小時(shí)
靈敏度	7.82 pg/mL
稀釋線性	84 - 124%
回收率	81 - 119%
板內(nèi)差	3.8%
板間差	5.3%

 

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

1. 標(biāo)曲數(shù)據(jù)

數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

2. 靈敏度檢測(cè)

TNF-α的最低檢測(cè)限為7.82 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測(cè)20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。

3. 精密度檢測(cè)

酶標(biāo)板內(nèi)精密度

3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測(cè)定8次，評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。

酶標(biāo)板間精密度

3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測(cè)24次，評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。

項(xiàng)目	板內(nèi)精密度			板間精密度
樣本	1	2	3	1	2	3
	8	8	8	24	24	24
平均值	940.0	241.4	57.9	942.6	236.5	59.6
標(biāo)準(zhǔn)差	40.0	9.5	1.9	64.0	9.2	3.2
變異系數(shù)（%）	4.3	3.9	3.3	6.8	3.9	5.3

4. 回收率檢測(cè)

 通過不同水平的TNF-α添加于樣本中來測(cè)定回收率，其回收率如下:

樣本類型	平均回收率(%)	范圍（%）
血清	112.3	103.0-119.1
血漿	94.0	81.0-104.5
細(xì)胞培養(yǎng)上清	90.0	82.6-98.0

5. 稀釋線性檢測(cè)

血清稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	104.4	102.0-107.1
1:04	106.0	98.0-112.4
1:08	116.9	108.1-122.1
1:16	97.6	88.1-108.7

 

血漿稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	107.1	95.2-115.2
1:04	109.4	105.2-114.0
1:08	118.1	118.2-124.2
1:16	107.2	99.8-113.9

 

細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例	平均期望值(%)	范圍（%）
1:02	107.1	94.5-122.9
1:04	104.0	88.3-120.2
1:08	104.7	84.3-123.2
1:16	94.2	85.7-106.1

6. 樣本值

應(yīng)用本試劑盒，檢測(cè)若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。

樣本類型	樣本數(shù)目	平均值（pg/mL）	樣本值（pg/mL）
血清	4	n.d.	n.d.
血漿	4	n.d.	n.d.
細(xì)胞培養(yǎng)上清	4	n.d.	n.d.

n.d. 指樣本濃度值低于檢測(cè)范圍內(nèi)得31.25 pg/mL

7. 測(cè)定特異性

本試劑盒識(shí)別天然和重組小鼠腫瘤壞死因子α。下述因子進(jìn)行了特異性的評(píng)估，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

Recombinant human:		Recombinant Mouse:
IL-1α	IL-10	IL-1α	IL-10
IL-1β	IL-12	IL-1β	IFN-γ
IL-2	IFN-γ	IL-2	VEGF
IL-4	TNF-α	IL-4	RANKL
IL-5	LIF	IL-5	TRAIL
IL-6	RANKL	IL-6
IL-8	TRAIL