產品說明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻
人白介素10 (Human IL-10)，也稱為細胞因子合成抑制因子（CSIF），能夠抑制Th1細胞的激活和相關細胞因子（如IL-1β和 TNF-α）的產生。IL-10是一種178個氨基酸的分子，含有兩個鏈內二硫鍵橋，并以36kDa的非共價相關同源二聚體的形式表達。成熟的人IL-10與牛、犬、馬、貓、小鼠、綿羊、豬和大鼠IL-10具有72%至86%的氨基酸序列同一性。IL-10可以靶向各種白細胞，減弱過度的免疫反應。它影響單核細胞/巨噬細胞的三個重要功能：抗原呈遞、免疫介質的釋放和吞噬作用，這也代表它抑制了單核細胞/巨噬細胞的所有功能。與IL-4、IL-5類似，IL-10也參與了自身免疫病的發(fā)展。如炎癥性腸?。↖BD）中可以觀察到IL-10 的存在；在慢性肝部炎癥中，IL-10起到了保護作用。
翌圣Human IL-10 ELISA(酶聯免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清中的IL-10。特異性抗IL-10抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經過孵育，樣本中存在的IL-10與固相抗體結合。洗滌去除未結合的物質后，加入檢測抗體孵育結合，經洗滌，再加入酶結合物(Streptavidin-HRP)孵育結合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應的深淺與樣本中IL-10的濃度成正比。加入終止液終止反應，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產品信息
|
貨號 |
97063ES48 / 97063ES96 |
|
規(guī)格 |
48 T / 96 T |
|
檢測范圍 |
62.5-4000 pg/mL |
|
檢測方法 |
雙抗夾心法 |
|
檢測時長 |
4.5小時 |
|
靈敏度 |
27.5 pg/mL |
|
稀釋線性 |
79 - 117% |
|
回收率 |
80 - 118% |
|
板內差 |
5.9% |
|
板間差 |
7.1% |
實驗數據
- 標曲數據
數據擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數據分析。
- 靈敏度檢測
IL-10的最低檢測限為27.5 pg/mL，通過使用重復檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
- 精密度檢測
酶標板內精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內重復測定6次，評估酶標板內的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復檢測18次，評估酶標板間的精密度。
|
項目 |
板內精密度 |
板間精密度 |
||||
|
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
6 |
6 |
6 |
18 |
18 |
18 |
|
|
平均值 |
2228.9 |
545.8 |
133.4 |
2200.5 |
537.4 |
126.9 |
|
標準差 |
191.2 |
18.6 |
7.8 |
193.7 |
20.8 |
11.0 |
|
變異系數（%） |
8.6 |
3.4 |
5.8 |
8.8 |
3.9 |
8.6 |
- 回收率檢測
通過不同水平的IL-10添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
|
樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
89.3 |
79.9-96.8 |
|
血漿 |
105 |
85.5-115.1 |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
106.3 |
83.8-117.6 |
- 稀釋線性檢測
|
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
109.1 |
100.9-117.3 |
|
1:04 |
99.6 |
88.5-111 |
|
1:08 |
104.3 |
98.7-114.5 |
|
1:16 |
100.3 |
85.2-115.5 |
|
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
97.8 |
93.6-102.5 |
|
1:04 |
96.6 |
90-101.3 |
|
1:08 |
93.0 |
78.9-102.7 |
|
1:16 |
90.8 |
81.4-97.3 |
|
細胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
101.8 |
98.3-104.4 |
|
1:04 |
89.2 |
83.8-101.3 |
|
1:08 |
98.6 |
85.1-113.7 |
|
1:16 |
89.8 |
81.2-97.1 |
- 樣本值
應用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
|
樣本類型 |
樣本數目 |
平均值（pg/mL） |
樣本值（pg/mL） |
|
血清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
|
血漿 |
8 |
n.d. |
n.d. |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
6 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內得62.5 pg/mL
- 測定特異性
本試劑盒識別天然和重組IL-10，沒有觀察到明顯的交叉反應和干擾影響。
|
Recombinant human: |
Recombinant Mouse: |
Recombinant Rat: |
|
|
IL- 1β |
IL-17A |
IL-1β |
IL-1β |
|
IL-2 |
IL-21 |
IL-2 |
IL-2 |
|
IL-4 |
IL-22 |
IL-4 |
IL-4 |
|
IL-5 |
IL-23 |
IL-6 |
IL-6 |
|
IL-6 |
TNF-α |
IL- 10 |
IL- 10 |
|
IL-8 |
|
IL- 17A |
IL- 17A |
|
IL-12 |
|
TNF-α |
TNF-α |
檢測簡圖
疑問解答
|
問題 |
造成原因 |
解決方法 |
|
標曲不好 |
移液量不準確 |
檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
|
稀釋方法不恰當 |
||
|
顯色值偏低 |
孵育時間太短 |
給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
|
移液量不足或稀釋不當 |
校準移液器和規(guī)范操作 |
|
|
CV偏高 |
酶標板清洗不當 |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
|
受污染的洗液 |
準備新鮮洗液 |
|
|
靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當 |
按照產品組分表進行保存。 |
