Human Flt-3 Ligand/FLT3L ELISA Kit 人Flt-3配體(FLT3L) ELISA檢測(cè)試劑盒
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產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)
FAQ
COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
人Fms樣酪氨酸激酶3配體（FLT3L），也稱(chēng)為Flt-3配體，是造血的重要調(diào)節(jié)因子。其受體Flt3在髓系、淋巴系和樹(shù)突狀細(xì)胞祖細(xì)胞上表達(dá)，F(xiàn)lt3的激活突變經(jīng)常在急性髓細(xì)胞白血?。ˋML）患者中發(fā)現(xiàn)，并與不良的臨床預(yù)后有關(guān)。成熟的人FLT3L由一個(gè)158個(gè)氨基酸的細(xì)胞外結(jié)構(gòu)域、一個(gè)細(xì)胞因子樣結(jié)構(gòu)域和一個(gè)近膜系鏈區(qū)、一個(gè)21個(gè)氨基酸的跨膜片段和一個(gè)30個(gè)氨基酸的細(xì)胞質(zhì)尾部組成。人和小鼠有大約72%相同氨基酸序列，并且這兩種蛋白質(zhì)表現(xiàn)出跨物種活性。同時(shí)FLT3L可表現(xiàn)出抗腫瘤活性，可能是由于其募集樹(shù)突細(xì)胞并引起其增殖的能力。
翌圣Human FLT3L ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒，用于定量測(cè)定血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的FLT3L。特異性抗FLT3L抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本，經(jīng)過(guò)孵育，樣本中存在的FLT3L與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測(cè)抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中FLT3L的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570 - 630 nm)測(cè)定吸光度值。
產(chǎn)品信息
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貨號(hào) |
97019ES48 / 97019ES96 |
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規(guī)格 |
48 T / 96 T |
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檢測(cè)范圍 |
15.63-1000 pg/mL |
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檢測(cè)方法 |
雙抗夾心法 |
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檢測(cè)時(shí)長(zhǎng) |
4.5小時(shí) |
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靈敏度 |
9.65 pg/mL |
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稀釋線性 |
75 - 125% |
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回收率 |
81 - 115% |
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板內(nèi)差 |
5.1% |
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板間差 |
8.5% |
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
- 標(biāo)曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。
- 靈敏度檢測(cè)
FLT3L的最低檢測(cè)限為9.65 pg/mL，通過(guò)使用重復(fù)檢測(cè)20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。
- 精密度檢測(cè)
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測(cè)定8次，評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測(cè)24次，評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。
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項(xiàng)目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
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樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
8 |
8 |
8 |
24 |
24 |
24 |
|
|
平均值 |
387.6 |
101.7 |
19.8 |
421.2 |
97.1 |
20.8 |
|
標(biāo)準(zhǔn)差 |
20.5 |
4.9 |
1.0 |
43.2 |
6.2 |
1.8 |
|
變異系數(shù)（%） |
5.3 |
4.9 |
5.1 |
10.3 |
6.4 |
8.9 |
- 回收率檢測(cè)
通過(guò)不同水平的FLT3L添加于樣本中來(lái)測(cè)定回收率，其回收率如下:
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樣本類(lèi)型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
107.2 |
95.4-113.2 |
|
血漿 |
104.2 |
87.2-115.3 |
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細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
95.7 |
81.4-109.4 |
- 稀釋線性檢測(cè)
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血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
102.3 |
93.1-106.4 |
|
1:04 |
95.7 |
92.3-104.6 |
|
1:08 |
102.4 |
97.0-109.7 |
|
1:16 |
99.9 |
94.7-109.0 |
|
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
95.6 |
95.4-96.0 |
|
1:04 |
96.7 |
82.7-10.9 |
|
1:08 |
88.2 |
75.9-104.3 |
|
1:16 |
103.0 |
74.7-125.5 |
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細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
102.2 |
97.7-106.1 |
|
1:04 |
91.2 |
78.5-96.4 |
|
1:08 |
91.9 |
85.0-96.9 |
|
1:16 |
110.5 |
97.1-121.5 |
- 樣本值
應(yīng)用本試劑盒，檢測(cè)若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
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樣本類(lèi)型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（pg/mL） |
樣本值（pg/mL） |
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血清 |
12 |
36.4 |
34.9-60.3 |
|
血漿 |
8 |
39.6 |
24.8-48 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
4 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測(cè)范圍內(nèi)得15.63 pg/mL
- 測(cè)定特異性
本試劑盒識(shí)別天然和重組FLT3L，沒(méi)有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
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Recombinant human: |
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EGF |
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Epo |
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G-CSF |
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GM-CSF |
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M-CSF |
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HGF |
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TGF-β1 |
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VEGF |
檢測(cè)簡(jiǎn)圖
疑問(wèn)解答
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問(wèn)題 |
造成原因 |
解決方法 |
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標(biāo)曲不好 |
移液量不準(zhǔn)確 |
檢查移液器，按時(shí)校準(zhǔn)，仔細(xì)操作，充分混勻時(shí)蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
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稀釋方法不恰當(dāng) |
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顯色值偏低 |
孵育時(shí)間太短 |
給予足夠的孵育時(shí)間，樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。 |
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移液量不足或稀釋不當(dāng) |
校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標(biāo)板清洗不當(dāng) |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機(jī)，檢查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
準(zhǔn)備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲(chǔ)存不當(dāng) |
按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。 |
