dsDNase (with RNase Inhibitor)是一種核酸內(nèi)切酶，能夠裂解DNA中的磷酸二酯鍵，生成帶有5'-磷酸和3'-羥基末端的寡核苷酸。dsDNase能夠特異性的消化雙鏈DNA而不會(huì)消化單鏈DNA、引物、探針和RNA。dsDNase具有熱敏感性，可在65℃條件下快速失活。該產(chǎn)品主要用于反轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)前快速去除RNA樣本中的基因組DNA污染，與傳統(tǒng)的使用DNase I去除基因組DNA污染的方法相比，無(wú)需額外加入EDTA失活，同時(shí)節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間，保證RNA定量的準(zhǔn)確性。

 

產(chǎn)品信息

貨號(hào)	14533ES50 / 14533ES80
規(guī)格	50 T / 1,000 T
活性定義	根據(jù)Kunitz實(shí)驗(yàn)方法，在25℃ pH5.0的條件下，以過(guò)量的大分子DNA為底物，在260 nm 波長(zhǎng)處每分鐘能引起吸光度增加0.001的酶量定義為1個(gè)活性單位（U）

 

組分信息

組分編號(hào)	產(chǎn)品名稱	14533ES50	14533ES80
14533-A	dsDNase (with RNase Inhibitor)	50 μL	1 mL
14533-B	10×dsDNase Bu?er	200 μL	4 mL

 

儲(chǔ)存條件

-25~-15℃保存，有效期2年。

 

使用說(shuō)明

1.于冰上配制如下反應(yīng)體系

組分	用量
dsDNase (with RNase Inhibitor)	1 μL
10×dsDNase Bu?er	1 μL
模板 RNA	X μL
總 RNA	1 pg~5 μg/10 μL
mRNA	0.1 pg~500 ng/10 μL
特異性 RNA	0.01 ng~500 ng/10 μL
Nuclease-Free Water	up to 10 μL

2.輕輕吹打混勻反應(yīng)體系后，將以上混合液在 37℃溫育 2~5 min；

3.65℃熱失活 10 min，迅速將獲得的RNA置于冰上，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

 

注意事項(xiàng)

1. 抑制條件：金屬離子、EDTA、SDS、DTT、β- 巰基乙醇、高鹽離子濃度等會(huì)抑制dsDNase的活性。

2. 若RNA樣本下游用于RT-PCR，且目的基因長(zhǎng)度≥3 kb，失活步驟前需添加終濃度為10 mM的DTT。

3. 熱滅活條件：1）65℃ 10 min；2）85℃ 5 min。

3. 該反應(yīng)體系無(wú)需再另外加入RNase Inhibitor。

4. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20230411