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            Human CXCL10/IP-10 ELISA Kit 人干擾素誘導(dǎo)蛋白10 ELISA檢測試劑盒

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            產(chǎn)品說明書

            FAQ

            COA

            已發(fā)表文獻

             

            IP-10最初被鑒定為單核細胞、成纖維細胞和內(nèi)皮細胞中的IFN-γ誘導(dǎo)基因。人IP-10的小鼠同系物,CRG-2,與人IP-10有大約67%的氨基酸序列同一性。IP-10的氨基酸序列確定該蛋白是CXC趨化因子亞家族的成員。

            翌圣Human CXCL10 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒,用于定量測定血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清中的人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(Human CXCL10)。特異性抗干擾素誘導(dǎo)蛋白10抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本,經(jīng)過孵育,樣本中存在的干擾素誘導(dǎo)蛋白10與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入檢測抗體(生物素標(biāo)記)孵育結(jié)合,經(jīng)洗滌,再加入酶結(jié)合物(HRP標(biāo)記鏈霉親和素)孵育結(jié)合。洗滌后,加入顯色底物 TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中干擾素誘導(dǎo)蛋白10的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm 主波長,630nm次波長測定吸光度值。

             

            產(chǎn)品信息

            貨號

            97013ES48 / 97013ES96 

            規(guī)格

            48 T / 96 T

            檢測范圍

            15.6-1000 pg/mL

            檢測方法

            雙抗夾心法

            檢測物種

            檢測時長

            4小時45分鐘

            靈敏度

            4.460 pg/mL

            稀釋線性

            72.2 - 119.4%

            回收率

            73.3 - 129.6%

            板內(nèi)差

            9.2%

            板間差

            6.5%

             

            實驗數(shù)據(jù)

            1. 標(biāo)曲數(shù)據(jù)

            數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,生成的標(biāo)曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。

             

            1. 靈敏度檢測

            人干擾素誘導(dǎo)蛋白10的最低檢測限為4.460 pg/mL,通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計算得出。

            1. 精密度檢測

            酶標(biāo)板內(nèi)精密度

            3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定20次,評估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。

            酶標(biāo)板間精密度

            3個已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測36次,評估酶標(biāo)板間的精密度。

            項目

            板內(nèi)精密度

            板間精密度

            樣本

            1

            2

            3

            1

            2

            3

            20

            20

            20

            36

            36

            36

            平均值

            553.0

            137.2

            37.4

            630.1

            142.2

            37.6

            標(biāo)準(zhǔn)差

            46.9

            12.4

            3.8

            55.3

            7.3

            1.8

            變異系數(shù)%

            8.5

            9.0

            10.0

            9.7

            5.2

            4.7

            1. 回收率檢測

              通過不同水平的人干擾素誘導(dǎo)蛋白10添加于樣本中來測定回收率,其回收率如下:

            樣本類型

            平均回收率(%)

            范圍(%)

            血清

            107.7

            94.5-125.3

            血漿

            105.1

            75.6-129.6

            細胞培養(yǎng)上清

            97.6

            73.3-121.3

            1. 稀釋線性檢測

            血清稀釋比例

            平均期望值(%)

            范圍(%)

            1:02

            108.4

            94.0-111.9

            1:04

            98.6

            88.3-112.6

            1:08

            104.7

            93.4-119.4

            1:16

            97.6

            88.4-112.0

             

            血漿稀釋比例

            平均期望值(%)

            范圍(%)

            1:02

            101.5

            90.2-113.6

            1:04

            100.3

            90.6-115.4

            1:08

            97.5

            84.4-111.9

            1:16

            91.1

            81.0-107.7

             

            細胞培養(yǎng)上清稀釋比例

            平均期望值(%)

            范圍(%)

            1:02

            93.9

            87.4-97.4

            1:04

            84.1

            73.9-95.7

            1:08

            86.2

            74.5-107.0

            1:16

            82.3

            72.2-100.1

            1. 樣本值

            應(yīng)用本試劑盒,檢測若干健康志愿者的樣本,志愿者的用藥史不詳。

            樣本類型

            樣本數(shù)目

            平均值(pg/mL)

            樣本值(pg/mL)

            血清

            10

            128

            40-490

            EDTA血漿

            4

            117

            35-340

            肝素血漿

            3

            138

            48-272

            枸櫞酸鈉血漿

            4

            172

            n.d.-424

            細胞培養(yǎng)上清

            10

            n.d.

            n.d.

            n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得15.6 pg/mL

            1. 測定特異性

            本試劑盒識別天然和重組人干擾素誘導(dǎo)蛋白10。下述因子進行了特異性的評估,沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。

            Recombinant human:

            Recombinant mouse:

            GROα

            IP-10/CRG-2

            NRG1-β1/HRG1-β1

             

            Lymphotactin

             

            MIG

             

            TNF-α

             

            TYK-2

             

             

            檢測簡圖

             

             

            疑問解答

            問題

            造成原因

            解決方法

            標(biāo)曲不好

            移液量不準(zhǔn)確

            檢查移液器,按時校準(zhǔn),仔細操作,充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。

            稀釋方法不恰當(dāng)

            顯色值偏低

            孵育時間太短

            給予足夠的孵育時間,樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。

            移液量不足或稀釋不當(dāng)

            校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作

            CV偏高

            酶標(biāo)板清洗不當(dāng)

            使用正確的洗滌工序;如果使用洗板機,檢查所有的端口是否堵塞。

            受污染的洗液

            準(zhǔn)備新鮮洗液

            靈敏度較低

            試劑盒儲存不當(dāng)

            按照產(chǎn)品組分表進行保存。

             

            400-6111-883