產(chǎn)品說明書
FAQ
COA
已發(fā)表文獻
趨化因子配體(CCL17)，也稱為胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TARC)，是CC趨化因子家族的小分子量細胞因子。CCL17編碼基因連同其它趨化因子CCL22和CX3CL1在人類中位于第16號染色體。CCL17組成性表達于胸腺中，在植物血凝素(PHA)刺激的外周血單個核細胞中瞬時表達。該趨化因子特異性地與T細胞結(jié)合，并通過與趨化因子受體CCR4結(jié)合展現(xiàn)其趨化作用。
翌圣Human CCL17 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿和細胞培養(yǎng)上清中的人趨化因子配體17 (Human CCL17)。特異性抗人趨化因子配體17 抗體預(yù)包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的人趨化因子配體17 與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測抗體（生物素標記）孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(HRP標記鏈霉親和素)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中人趨化因子配體17 的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 主波長，630nm次波長測定吸光度值。
產(chǎn)品信息
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貨號 |
97008ES48 / 97008ES96 |
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規(guī)格 |
48 T / 96 T |
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檢測范圍 |
6.25-400 pg/mL |
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檢測方法 |
雙抗夾心法 |
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檢測物種 |
人 |
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檢測時長 |
4小時40分鐘 |
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靈敏度 |
0.176 pg/mL |
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稀釋線性 |
77.8 - 118.6% |
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回收率 |
76.7 - 119.5% |
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板內(nèi)差 |
3.7% |
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板間差 |
4.1% |
實驗數(shù)據(jù)
- 標曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標準曲線，生成的標曲用于實驗數(shù)據(jù)分析。
標準曲線圖
- 靈敏度檢測
人趨化因子配體17 的最低檢測限為0.176 pg/mL，通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標準差計算得出。
- 精密度檢測
酶標板內(nèi)精密度
3個已知濃度的樣本酶標板內(nèi)重復(fù)測定20次，評估酶標板內(nèi)的精密度。
酶標板間精密度
3個已知濃度的樣本酶標板間重復(fù)檢測36次，評估酶標板間的精密度。
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項目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
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樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
20 |
20 |
20 |
36 |
36 |
36 |
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|
平均值 |
322.2 |
76.2 |
20.1 |
318.8 |
80.6 |
19.2 |
|
標準差 |
12.2 |
2.1 |
0.9 |
3.1 |
5.3 |
0.9 |
|
變異系數(shù)（%） |
3.8 |
2.8 |
4.5 |
1.0 |
6.6 |
4.7 |
- 回收率檢測
通過不同水平的人趨化因子配體17 添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
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樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
100.4 |
91.1-113.4 |
|
血漿 |
96.3 |
76.7-119.5 |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
106.9 |
99.8-116.0 |
- 稀釋線性檢測
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血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
94.5 |
90.6-97.8 |
|
1:04 |
89.4 |
84.0-96.6 |
|
1:08 |
88.4 |
77.8-95.2 |
|
1:16 |
83.5 |
81.3-87.4 |
|
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
102.6 |
84.2-113.8 |
|
1:04 |
108.4 |
93.9-118.6 |
|
1:08 |
109.5 |
93.9-117.6 |
|
1:16 |
104.1 |
97.2-111.4 |
|
細胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
109.5 |
102.7-114.0 |
|
1:04 |
111.5 |
105.8-115.8 |
|
1:08 |
105.7 |
102.7-110.8 |
|
1:16 |
98.1 |
87.5-109. |
- 樣本值
應(yīng)用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
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樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（pg/mL） |
樣本值（pg/mL） |
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血清 |
10 |
188 |
22-540 |
|
EDTA血漿 |
4 |
116 |
38-370 |
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肝素血漿 |
3 |
208 |
180-241 |
|
細胞培養(yǎng)上清 |
10 |
n.d. |
n.d. |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得3.5 pg/mL
- 測定特異性
本試劑盒識別天然和重組人趨化因子配體17。下述因子進行了特異性的評估，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
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Recombinant human: |
Recombinant mouse: |
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6Ckine |
TARC |
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MCP-1 |
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MIP-1α |
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MIP-1β |
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RANTES |
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TECK |
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檢測簡圖
疑問解答
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問題 |
造成原因 |
解決方法 |
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標曲不好 |
移液量不準確 |
檢查移液器，按時校準，仔細操作，充分混勻時蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
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稀釋方法不恰當 |
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顯色值偏低 |
孵育時間太短 |
給予足夠的孵育時間，樣本和溶解的標準品隔夜后更換。 |
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移液量不足或稀釋不當 |
校準移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標板清洗不當 |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機，檢查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
準備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲存不當 |
按照產(chǎn)品組分表進行保存。 |
