Hieff Unicon^® Hotstart E-Taq DNA Polymerase是一款采用公司自主研制的雙抗體進(jìn)行雙封閉的熱啟動DNA聚合酶。本品不僅封閉了Taq DNA聚合酶5'→3'聚合酶活性，同時也封閉了5'→3'核酸外切酶活性。在預(yù)變性溫度下加熱30 sec封閉抗體即可完全失活，釋放出 DNA 聚合酶活性和核酸外切酶活性。雙封閉特性不僅能有效防止錯配或引物二聚體引起的非特異性擴增，又能有效抑制探針降解產(chǎn)生的熒光信號下降，雙重保障使體外檢測試劑在運輸或室溫使用過程中更加穩(wěn)定。

 

產(chǎn)品組分

組分編號	組分名稱	產(chǎn)品編號/規(guī)格
		13824ES72 (250 U)	13824ES76 (500 U)	13824ES80 (1000 U)	13824ES92 (10000 U)	13824ES93 (25000 U)
13824	Hotstart E-Taq (20 U/μL)	12.5 μL	25 μL	50 μL	500 μL	1.25 mL

 

運輸與保存方式

冰袋加干冰運輸。-20°C儲存，有效期2年。

 

反應(yīng)體系

組分	體積 (μL)	終濃度
2×Buffera	25	1×
Primer/Probe mixb	X	0.1 μmol/L-0.5 μmol/L
Hotstart E-Taq (20 U/μL)	0.3	0.12 U/μL
模板DNAc	X	0.1-100 ng
無菌超純水	up to 50	-

【注】：a）根據(jù)具體的實驗應(yīng)用，需自備相應(yīng)的反應(yīng)Buffer。

b/c）上表中DNA量和引物濃度均為推薦濃度，可根據(jù)具體實驗情況調(diào)整最適濃度。

參考擴增程序（兩步法）

循環(huán)步驟	溫度	時間	循環(huán)數(shù)
預(yù)變性	95°C	5 min	1
變性	95°C	15 sec	45
退火/延伸	60°Ca	30 secb

【注】： a）擴增反應(yīng)：擴增反應(yīng)溫度根據(jù)設(shè)計的引物Tm值進(jìn)行調(diào)整。

b）熒光信號采集：不同的qPCR儀器所需的熒光信號采集時間不同，請根據(jù)最短時間限制進(jìn)行設(shè)置。

 

HB220301