產品簡介

 

Hieff^® DNA Library Prep Kit for ONT是針對三代Nanopore測序平臺開發(fā)的DNA建庫試劑盒，該試劑盒對酶和緩沖buffer進行了定向的改造和優(yōu)化，極大的提升了長片段的接頭連接效率，同時末端修復加A尾后無需純化，可直接進行Barcode連接，實驗流程更便捷。

 

產品應用

 

DNA建庫；三代建庫；TGS建庫；Nanopore測序；ONT測序；

 

產品優(yōu)勢

 

• 操作簡便：末端修復、加A尾一步完成，產物無需純化，可直接進行Barcode接頭連接
• 兼容廣泛：可兼容動物、植物、微生物等多種樣本；兼容gDNA和擴增子樣本
• 數據表現優(yōu)異：文庫產出高、測序數據質量好

 

組分信息

 

組分編號		組分名稱	13301ES08	13301ES24	13301ES96
			8 T	24 T	96 T
13301-A		Endprep Buffer	56 μL	168 μL	672 μL
13301-B		Endprep Enzyme	24 μL	72 μL	288 μL
13301-C		Rapid Ligase Master Mix	280 μL	840 μL	4×840 μL
13301-D		Rapid Ligation Reaction Buffer（5×）	160 μL	480 μL	2×960 μL
13301-E		Rapid T4 DNA Ligase	40 μL	120 μL	480 μL
13301-F		Elution Buffer	160 μL	480 μL	2×960 μL

 

儲存條件

 

-25~-15℃保存，有效期1年。

 

注意事項

 

1. Native Barcode的連接后的純化和Native Adapter的純化操作步驟使用的漂洗試劑是不一樣的，請務必注意兩個純化步驟使用的試劑。

2. 為保證文庫構建成功，建議對Input DNA的片段長度和完整性進行驗證(驗證方法可選用毛細管電泳或其他等效方法)。DNA質量（完整度、碎片化）、純度（如化學污染、RNA殘留等）、使用量過多或過少均可能影響文庫的產出。

3. 請務必按照自備材料做好實驗前準備，避免無法正常按操作說明書進行實驗，造成樣本和試劑的浪費。

4. 實驗進行多個樣本文庫的制備，請記錄每個樣本對應使用的Native Barcode的編號。

 

操作流程

 

圖1.  Hieff^® DNA Library Prep Kit for ONT建庫流程

 

 

實驗案例

13301ES 多樣本建庫兼容性

模板	Input DNA	文庫回收率	下機數據量	Reads mean length	Reads max length	Reads N50 length
Human gDNA（4-20 K）	1μg	96%	15 G	9136.1715	113518	12633
1.7 K	500 ng	65%	0.33G	1791	23493	1771
3 K	500 ng	75%	0.31G	2557	26165	3005
1-16 K	1 μg	34.5%	2.89G	4189	41457	5893
質粒1	300 ng	＞60%	0.96 G	2413	23637	2658
質粒2	300 ng	＞60%	0.83 G	2129	35855	2808

 

 

Ver. CN20250312