MolPure? Magnetic Spots DNA Kit磁珠法干血斑DNA提取試劑盒
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產(chǎn)品說明書
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COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
產(chǎn)品簡介
MolPure® Magnetic Spots DNA Kit磁珠法干血斑DNA提取試劑盒適用于從干血斑或血卡樣本中提取高純度的基因組 DNA，該方法采用磁珠純化技術(shù)，提取過程中無需使用有毒的酚氯仿抽提，安全無毒且快捷。得到的產(chǎn)物可直接用于 PCR、qPCR、文庫構(gòu)建等實(shí)驗(yàn)。配合磁珠法自動(dòng)化提取儀器使用，可實(shí)現(xiàn)核酸的高通量提取。
組分信息
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類別 |
組分編號(hào) |
組分名稱 |
18554ES48 |
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Part Ⅰ |
18554-A |
蛋白酶K |
1.1 mL/支×1 |
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Part Ⅱ |
18554-B |
磁珠懸浮液 |
1.1 mL/支×1 |
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18554-C |
裂解液 |
30 mL/瓶×1 |
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18554-D |
裂解結(jié)合液 |
35 mL/瓶×1 |
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18554-E |
洗滌液A |
40 mL/瓶×1 |
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18554-F |
洗滌液B |
77 mL/瓶×1 |
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18554-G |
洗脫液 |
5 mL/瓶×1 |
儲(chǔ)存條件
Part Ⅰ，18554-A蛋白酶 K ，2~8℃保存，室溫運(yùn)輸，有效期為 18 個(gè)月。
Part Ⅱ，室溫保存，室溫運(yùn)輸，有效期為 18 個(gè)月。
注意事項(xiàng)
- 本試劑盒中的多種緩沖液含有胍鹽，為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。并按照安全標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防措施來處理。不要讓緩沖液接觸到皮膚、眼睛以及黏膜，如果確實(shí)發(fā)生，請(qǐng)立即用大量清水清洗并就醫(yī)。
- 如果溶液出現(xiàn)沉淀，需要 30℃水浴至沉淀完全溶解后方可使用。
- 如果裂解液出現(xiàn)沉淀，可 60℃水浴至沉淀完全溶解后方可使用。
- 如果磁珠懸浮液凍結(jié)，請(qǐng)勿使用。
- 本試劑盒中的多種緩沖液含胍鹽，請(qǐng)勿用氧化性消毒劑如次氯酸鈉進(jìn)行處理，否則會(huì)釋放有毒氣體，須按醫(yī)療廢物
進(jìn)行處理。
- 洗脫時(shí)可能存在磁珠殘留，吸取樣本時(shí)應(yīng)盡量避免吸入磁珠。
樣本說明
- 適用標(biāo)本類型：干血斑/血卡。
- 標(biāo)本保存和運(yùn)輸：標(biāo)本可立即用于測試，也可以保存于-70℃或更低溫度待測，保存期為 6 個(gè)月，應(yīng)避免反復(fù)凍融。標(biāo)本運(yùn)輸采用冷鏈運(yùn)輸。
- 凍融要求：速凍速融，避免反復(fù)凍融。
實(shí)驗(yàn)步驟
- 試劑準(zhǔn)備
1.1實(shí)驗(yàn)前檢查溶液是否有沉淀，磁珠是否能重懸。
- 操作步驟
2.1 用打孔器在 FTA Card 或血片上打 3~5 個(gè) 3 mm 直徑的血片，如無打孔器，需將血片剪碎。轉(zhuǎn)移至 1.5 mL 或
2.0 mL 離心管中。
2.2 加入 400 μL 裂解液、20 μL 蛋白酶 K，高速渦旋混勻 30 s，檢查確保血片浸沒在溶液中。75℃振蕩溫浴 45
min，若恒溫儀無振蕩功能，可在溫浴期間每 15 min取出渦旋 1 次，每次 30 s。
2.3 待溫浴后的溶液降至室溫后，瞬時(shí)離心收集管蓋液滴至管中。
2.4 將所有溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中，避免吸到沉淀。
2.5 加入 600 μL裂解結(jié)合液、20 μL磁珠懸浮液，振蕩或渦旋 5~7 min使磁珠吸附 DNA。
2.6 轉(zhuǎn)移至磁力架上進(jìn)行磁分離至溶液透亮，吸棄溶液。
2.7 加入 700 μL洗滌液 A，渦旋 10 s打散磁珠后轉(zhuǎn)至磁力架進(jìn)行磁分離至溶液澄清，吸棄溶液。
2.8 加入 700 μL 洗滌液 B，渦旋 10 s打散磁珠后轉(zhuǎn)至磁力架進(jìn)行磁分離至溶液澄清，吸棄溶液。
2.9 再次加入 700 μL 洗滌液 B，渦旋 10 s打散磁珠后轉(zhuǎn)至磁力架進(jìn)行磁分離至溶液澄清，吸棄溶液。
2.10 掌上離心機(jī)瞬時(shí)離心后，轉(zhuǎn)至磁力架上吸附至溶液澄清，充分吸棄所有溶液，打開管蓋，空氣干燥 3~5 min。
注意：乙醇?xì)埩魰?huì)抑制后續(xù)的酶反應(yīng)，所以晾干時(shí)要確保乙醇揮發(fā)干凈。切勿干燥過久，以免影響后續(xù)洗脫效果。
2.11 加入 30~50 μL 洗脫液，高速渦旋 2~3 min打散磁珠。
2.12 60℃溫浴 5 min，然后高速渦旋 30 s。
2.13 瞬時(shí)離心收集管蓋液滴至管中，轉(zhuǎn)移至磁力架上進(jìn)行磁分離。
2.14 把基因組 DNA 溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中待用。如果不立即使用，請(qǐng)存儲(chǔ)于-15~-25℃，長期保存請(qǐng)放置于-70℃或
更低的溫度。
Ver.CN20240607
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