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            High Density Lipoprotein Cholesterol Content Assay Kit 高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量檢測試劑盒(微量法)

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            產(chǎn)品說明書

            FAQ

            COA

            已發(fā)表文獻

            產(chǎn)品簡介

            高密度脂蛋白是血清中顆粒密度最大的一組脂蛋白,主要在肝臟合成。一般通過檢測高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的含量來反映高密度脂蛋白水平,高密度脂蛋白膽固醇與心血管疾病的發(fā)病率和病變程度呈負相關。

            膽固醇檢測4款相關產(chǎn)品如下:

            產(chǎn)品貨號

            60723ES

            60724ES

            60736ES

            60737ES

            產(chǎn)品名稱

            膽固醇(TC)含量檢測試劑盒

            游離膽固醇(FC)含量檢測試劑盒

            低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量檢測試劑盒

            高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)含量檢測試劑盒

            功能

            檢測膽固醇含量

            檢測游離膽固醇含量

            檢測低密度脂蛋白膽固醇含量

            檢測高密度脂蛋白膽固醇含量

            適用場景

            血清、血漿、細胞、組織等樣本中的總膽固醇含量測定,與心腦血管疾病以及多種病理狀態(tài)密切相關。

            用于檢測血清、血漿、動物組織樣本中的游離膽固醇含量。

            用于動脈粥樣硬化的輔助診斷和治療,評估心血管健康狀況和預防心血管疾病

            用于體外定量測定血清或血漿中的高密度脂蛋白膽固醇,有助于評估心血管健康狀況

             

            產(chǎn)品信息

            貨號

            60737ES59

            規(guī)格

            96 T

             

            組分信息

            組分編號

            組分名稱

            組分信息

            規(guī)格

            儲存條件

            60737-A

            試劑一

            MES緩沖液

            50 mmol/L

            18 mL

            2~8℃避光保存

            抗壞血酸氧化酶

            1 KU/L

            疊氮鈉

            0.5 g/L

            60737-B

            試劑

            啟動試劑

            1 g/L

            6 mL

            膽固醇酯酶

            ≥800 U/L

            膽固醇氧化酶

            ≥400 U/L

            過氧化物酶

            ≥5 KU/L

            4-氨基安替比林

            0.5 mmol/L

            疊氮鈉

            0.5 g/L

            曲拉通-100

            0.1%

            60737-C

            標準品

            膽固醇

            見標簽

            1 支

            標準品配制:按照標準品標簽的指示配制

            96孔酶標板一塊

            室溫

             

            儲存條件

            2~8℃避光保存,有效期12個月

             

            使用說明

            1. 樣品處理

            1血清/血漿樣本:直接測定,如超過線性范圍用生理鹽水稀釋后測定。

            2組織樣本:準確稱取組織重量,按重量g):體積mL)=1:9的比例,加入9倍體積的勻漿介質(zhì),冰水浴條件下機械勻漿,2500轉/分,離心10分鐘,取上清液待測。注:如組織樣本為非高脂樣本,勻漿介質(zhì)統(tǒng)一用PBS緩沖液0.1 mol/L,pH 7.4,60158ES)或生理鹽水進行提取;如組織樣本為高脂樣本或部分為高脂樣本,勻漿介質(zhì)可統(tǒng)一用無水乙醇進行提取?!?/font>

            3)培養(yǎng)液樣本:吸取培養(yǎng)液,1000轉/分鐘,離心10分鐘,取上清測定。

            4)細胞樣本:

            a細胞收集將制備好的細胞懸液取出,1000轉/分,離心10分鐘,棄上清液,留細胞沉淀;推薦PBS緩沖液0.1 mol/L,pH 7.4,60158ES)清洗1-2;1000轉/分,離心10分鐘,棄上清液,留細胞沉淀。

            b細胞破碎加入0.2-0.3 mL的勻漿介質(zhì)(60158ES PBS緩沖液或生理鹽水)進行勻漿冰水浴條件下超聲破碎或手動勻漿,制備好的勻漿液不離心直接測定。也可采用裂解液裂解,裂解好的液體不離心直接測定。【注:一般建議細胞密度在100萬個/mL以上,破碎好的液體可顯微鏡觀察細胞是否破碎完全。】

            1. 操作步驟

            【注:正式測定前建議2-3個預期差異較大的樣本做預測定。

            1酶標儀預熱30分鐘以上,調(diào)節(jié)波長至600 nm,蒸餾水調(diào)零。

            2按操作表依次加入各試劑

            96孔板操作,酶標儀比色

             

            空白孔

            校準孔

            樣本孔

            蒸餾水(μL)

            2.5

             

             

            校準品μL)

             

            2.5

             

            樣本μL)

             

             

            2.5

            試劑一(μL)

            180

            180

            180

            輕輕振蕩孔板混勻,37℃孵育5分鐘,波長600 nm,酶標儀測定各孔吸光度值A1

            試劑二(μL)

            60

            60

            60

            輕輕振蕩混勻,37℃孵育5分鐘,波長600 nm,酶標儀測定各孔吸光度值A2,計算△A=A2-A1

            1. 計算公式

            1)血液等液體樣本計算公式:

            LDL-C含量mmol/L)=A測定-A空白)÷A標準-A空白)xC標準品

            2)組織、細胞樣本計算公式:

            1)勻漿介質(zhì)用PBS緩沖液(此方法需單獨測定勻漿液蛋白濃度

            LDL-C 含量mmol/gprot)=A 測定-A 空白)÷A 標準-A 空白)xC標準品÷ Cpr

            C標準:標準液濃度,mmol/L;Cpr:勻漿液蛋白濃度,gprot/L (需單獨測定勻漿液蛋白濃度)

            2)勻漿介質(zhì)用無水乙醇(此方法不需要測定勻漿液蛋白濃度

            LDL-C含量mmol/g組織=A測定-A空白)÷A標準-A空白)xC標準品 ÷W÷V樣總)

            C標準:標準液濃度,mmol/L;W:樣本質(zhì)量,g;V樣總:勻漿液總體積,L【注:細胞樣本測定時可將W÷V樣總)替換為細胞前處理時的細胞密度?!?/font>

             

            注意事項 

            1. 樣品含量如超出檢測范圍上限時,可用生理鹽水稀釋樣本后進行測定,測定結果乘以稀釋倍數(shù);如樣品含量較低也可以適當加大進樣量(如10 μL20 μL,同時要將標準品稀釋相應的倍數(shù)后和樣本保持相同的加樣量。
            2. 該試劑需注意防止含有葡萄糖、膽固醇等試劑的污染。
            3. 開啟后2~8℃可穩(wěn)定保存1個月。
            4. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
            5. 本產(chǎn)品僅作科研用途!

            Ver.CN20240430

             

            400-6111-883