Human Galectin-1 ELISA Kit 人Galectin-1體外ELISA檢測試劑盒
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產(chǎn)品說明書
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COA
已發(fā)表文獻(xiàn)
產(chǎn)品簡介
Galectin-1，半乳糖凝集素家族成員之一。半乳糖凝集素在細(xì)胞內(nèi)和分泌后的許多系統(tǒng)中發(fā)揮作用，含有一個(gè)或兩個(gè)碳水化合物識(shí)別結(jié)構(gòu)域（CRR），其介導(dǎo)對(duì)含N-乙酰氨基半乳糖的糖蛋白的識(shí)別。Galectin-1可正向或負(fù)向調(diào)節(jié)細(xì)胞生長和增殖，通過誘導(dǎo)Th2型細(xì)胞因子和抑制促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生來調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的分泌。Galectin-1還可以調(diào)節(jié)細(xì)胞-細(xì)胞以及細(xì)胞-基質(zhì)的相互作用，促進(jìn)細(xì)胞附著或分離。此外，Galectin-1在免疫抑制和抗炎特性中也發(fā)揮重要作用。
翌圣Human Galectin-1 ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒是一種體外酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒，用于定量測定血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清中的Galectin-1。特異性抗Galectin-1抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本，經(jīng)過孵育，樣本中存在的Galectin-1與固相抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入檢測抗體孵育結(jié)合，經(jīng)洗滌，再加入酶結(jié)合物(Streptavidin-HRP)孵育結(jié)合。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中Galectin-1的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm 波長(參考波長570 - 630 nm)測定吸光度值。
產(chǎn)品信息
|
貨號(hào) |
97020ES48 / 97020ES96 |
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規(guī)格 |
48 T / 96 T |
|
檢測范圍 |
0.31-20 ng/mL |
|
檢測方法 |
雙抗夾心法 |
|
檢測時(shí)長 |
4.5小時(shí) |
|
靈敏度 |
0.08 ng/mL |
|
稀釋線性 |
76 - 120% |
|
回收率 |
84 - 123% |
|
板內(nèi)差 |
5.7% |
|
板間差 |
8.1% |
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
- 標(biāo)曲數(shù)據(jù)
數(shù)據(jù)擬合繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，生成的標(biāo)曲用于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析。
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
|
濃度（ng/mL） |
顯色值 |
平均值 |
校準(zhǔn)值 |
|
|
20 |
2.726 |
2.682 |
2.704 |
2.709 |
|
10 |
2.082 |
1.916 |
1.999 |
1.981 |
|
5 |
1.327 |
1.202 |
1.264 |
1.291 |
|
2.5 |
0.824 |
0.742 |
0.783 |
0.766 |
|
1.25 |
0.438 |
0.404 |
0.421 |
0.427 |
|
0.63 |
0.240 |
0.243 |
0.241 |
0.234 |
|
0.31 |
0.123 |
0.125 |
0.124 |
0.127 |
|
0 |
0.015 |
0.016 |
0.016 |
/ |
- 靈敏度檢測
Galectin-1的最低檢測限為0.08 ng/mL，通過使用重復(fù)檢測20次零孔OD值的均值與標(biāo)準(zhǔn)差計(jì)算得出。
- 精密度檢測
酶標(biāo)板內(nèi)精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測定6次，評(píng)估酶標(biāo)板內(nèi)的精密度。
酶標(biāo)板間精密度
3個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測22次，評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。
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項(xiàng)目 |
板內(nèi)精密度 |
板間精密度 |
||||
|
樣本 |
1 |
2 |
3 |
1 |
2 |
3 |
|
6 |
6 |
6 |
22 |
22 |
22 |
|
|
平均值 |
9.00 |
2.22 |
0.64 |
9.03 |
2.29 |
0.65 |
|
標(biāo)準(zhǔn)差 |
0.58 |
0.11 |
0.04 |
0.90 |
0.16 |
0.05 |
|
變異系數(shù)（%） |
6.48 |
4.92 |
5.66 |
10.00 |
6.91 |
7.50 |
- 回收率檢測
通過不同水平的Galectin-1添加于樣本中來測定回收率，其回收率如下:
|
樣本類型 |
平均回收率(%) |
范圍（%） |
|
血清 |
101.3 |
89.4-123.2 |
|
血漿 |
101.0 |
84.0-118.9 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
100.6 |
95.2-110.8 |
- 稀釋線性檢測
|
血清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
94.0 |
84.1-107.8 |
|
1:04 |
107.2 |
98.2-115.9 |
|
1:08 |
104.4 |
98.1-115.9 |
|
1:16 |
109.1 |
98.9-119.9 |
|
血漿稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
92.2 |
76.4-100.6 |
|
1:04 |
99.2 |
98.0-99.8 |
|
1:08 |
101.3 |
100.5-101.9 |
|
1:16 |
107.7 |
92.2-118.1 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清稀釋比例 |
平均期望值(%) |
范圍（%） |
|
1:02 |
84.7 |
78.9-88.8 |
|
1:04 |
95.5 |
88.6-102.3 |
|
1:08 |
99.5 |
98.5-100.6 |
|
1:16 |
100.2 |
94.1-106.9 |
- 樣本值
應(yīng)用本試劑盒，檢測若干健康志愿者的樣本，志愿者的用藥史不詳。
|
樣本類型 |
樣本數(shù)目 |
平均值（ng/mL） |
樣本值（ng/mL） |
|
血清 |
8 |
0.36 |
n.d-2.08 |
|
血漿 |
6 |
0.51 |
n.d-1.28 |
|
細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
4 |
0.35 |
n.d-0.7 |
n.d. 指樣本濃度值低于檢測范圍內(nèi)得0.31 ng/mL
- 測定特異性
本試劑盒識(shí)別天然和重組Galectin-1，沒有觀察到明顯的交叉反應(yīng)和干擾影響。
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Recombinant human: |
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Galectin-2 |
|
Galectin-3 |
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Galectin-4 |
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Galectin-7 |
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Galectin-8 |
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Fibronectin |
檢測簡圖
疑問解答
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問題 |
造成原因 |
解決方法 |
|
標(biāo)曲不好 |
移液量不準(zhǔn)確 |
檢查移液器，按時(shí)校準(zhǔn)，仔細(xì)操作，充分混勻時(shí)蓋緊管口并盡量避免泡沫。 |
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稀釋方法不恰當(dāng) |
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顯色值偏低 |
孵育時(shí)間太短 |
給予足夠的孵育時(shí)間，樣本和溶解的標(biāo)準(zhǔn)品隔夜后更換。 |
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移液量不足或稀釋不當(dāng) |
校準(zhǔn)移液器和規(guī)范操作 |
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CV偏高 |
酶標(biāo)板清洗不當(dāng) |
使用正確的洗滌工序；如果使用洗板機(jī)，檢查所有的端口是否堵塞。 |
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受污染的洗液 |
準(zhǔn)備新鮮洗液 |
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靈敏度較低 |
試劑盒儲(chǔ)存不當(dāng) |
按照產(chǎn)品組分表進(jìn)行保存。 |
