產(chǎn)品簡介

 

Cas9 Nuclease來源于野生型釀膿鏈球菌S. pyogenes，是依賴RNA介導(dǎo)的內(nèi)切核酸酶，可以特異地切割雙鏈DNA（在DNA PAM存在的情況下，也可以切割單鏈DNA或單鏈RNA）。Cas9切割位點位于目標(biāo)序列（target sequence）內(nèi)，離PAM（NGG）區(qū)3個堿基。本產(chǎn)品經(jīng)過密碼子優(yōu)化及核定位信號（NLS）設(shè)計，由大腸桿菌重組表達(dá)而來，編輯效率高，可用于細(xì)胞（造血干細(xì)胞、T細(xì)胞等）的基因修飾，也可用于分子診斷，檢測病原體等。

 

產(chǎn)品信息

 

貨號	14701ES60 / 14701ES76 / 14701ES03
規(guī)格	100 μg / 500 μg / 1 mg
來源	大腸桿菌重組表達(dá)來源于Streptococcus pyogenes的Cas9基因
濃度	10 mg/mL
純度	≥95%
標(biāo)簽	His

 

組分信息

 

組分編號	組分名稱	14701ES60	14701ES76	14701ES03
14701-A	Cas9 Nuclease（10 mg/mL）	10 μL	50 μL	100 μL
14701-B	10×Cas9 Nuclease Reaction Buffer	500 μL	1 mL	1 mL

 

產(chǎn)品應(yīng)用

 

基于CRISPR/Cas9技術(shù)的基因組編輯；

細(xì)胞與基因治療藥物（造血干細(xì)胞、T細(xì)胞等）的基因修飾；

體外篩選有效sgRNA；

體外剪切靶DNA。

 

儲存條件

 

-25~-15℃儲存，有效期1年。

 

使用說明

 

RNP制備：

1. 用1×TE Buffer（pH 7.5）溶解sgRNA粉末至終濃度為100 μM，充分震蕩混勻。

2. 配制以下體系并充分混勻：

組分	體積（μL）
Cas9 Nuclease (10 mg/mL)	1.28
sgRNA (100 μM)	2.34
PBS (可選購Cat#41403)	1.38
Total	5

注：Cas9 Nuclease與sgRNA的摩爾比約為1：3。

3. 室溫孵育20min。

 

注意事項

 

1. 為防止RNase污染，請保持實驗區(qū)干凈整潔，操作時需穿戴干凈的手套、口罩，實驗所用槍頭、離心管等耗材均為 RNase-free。

2. 避免反復(fù)凍融。首次溶解之后，建議按照使用量分裝保存。

3. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

4. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

 

 

Ver.CN20241126